Упрощенная HTML-версия
47
В результате сульфомуцины выявлялись в цилиндрических клетках,
окрашиваясь в черный или коричневый цвет.
2.4. Иммунногистохимический метод исследования
Иммуногистохимическое исследование выполняли на парафиновых
срезах. Демаскировка антигенов осуществлялась в цитратном буфере
(pH=6,0) при кипячении на водяной бане на протяжении 1 часа.
Использовали первичные ready to use (готовые к использованию, без
разведения) мышиные моноклональные антитела к CD4 (клон - 1F6), CD8
(клон - 144B), CD138 (клон - MI15) («DAKO», Дания), CD20 (клон - L26),
CD68 (клон - KP1) («Diagnostic Biosystems», США) и кроличьи
поликлональные антитела к IgA, IgG («DAKO», Дания) (табл. 2). Ядра
докрашивались гематоксилином Майера. Биотинилированные антитела
второго слоя и стрептавидин, меченный пероксидазой, входили в
системувизуализации KP-500 («Diagnostic Biosystems», США).
Определяли относительное количество позитивно окрашенных клеток,
подсчитывая при 400-кратном увеличении долю (в %) положительно
окрашенных клеток мононуклеарного воспалительного инфильтрата в
собственной пластинке слизистой оболочки желудка в 10 случайно
выбранных полях зрения (не менее 1000 клеток). Подсчет CD138+, IgA+,
IgG+ клеток проводился в 1 мм
2
препарата, ввиду их относительно малого
процентного соотношения среди других клеток воспалительного
инфильтрата СОЖ.