Упрощенная HTML-версия
46
отмывкой в дистиллированной воде в течение 5 минут. Затем окрашивали в
темноте реактивом Шиффа (на основе нейтрального фуксина) в течение 15
минут. После чего проводили троекратную промывку в сернистой воде
продолжительностью 3 минуты каждая и докрашивали гематоксилином.
Сернистую воду получали при растворении 0,5 г. пиросульфита натрия в 100
мл дистиллированной воды с добавлением 1 мл. концентрированной соляной
кислоты. В результате сиаломуцины окрашивались в голубой цвет,
нейтральные муцины – в малиновый цвет, также как и щеточная каемка
абсорбтивного эпителия.
При кишечной метаплазии IIB типа сиаломуцины локализовались в
цилиндрических клетках (голубое окрашивание). При кишечной метаплазии
IIA типа в цилиндрических клетках верифицировались нейтральные муцины,
которые при помощи ШИК-реакции окрашивались в малиновый цвет.
В аналогичный цвет при помощи этой реакции окрашивалась щеточная
каемка, что позволяло установить наличие IA типа кишечной метаплазии.
При этом отсутствие муцинов указывало на наличие IIA типа кишечной
метаплазии.
Комбинированная окраска с диамином железа и альциановым синим
использовалась для верификации III типа кишечной метаплазии. Применение
диамина железа позволяло выявить наличие сульфомуцинов. Докраска
альциановым синим позволяла выявить участки содержащие сиаломуцины.
Для проведения данного окрашивания срезы депарафинировали, окрашивали
в растворе диамина железа на протяжении 20 часов. Состав раствора был
следующим: 120 мг. N,N-диметил-мета-фенилендиамина дигидрохлорида, 20
мг.
N,N-диметил-пара-фенилендиамина
дигидрохлорида,
50
мл.
дистиллированной воды и 1,4 мл. 60% раствора хлорида железа (III)
гексагидрата. Препарат промывали в проточной воде. Затем окрашивали
альциановым синим при pH=2,5 в течение 3 мин. Ядра докрашивали
гематоксилином.