Упрощенная HTML-версия
13
сыворотка, и, если в ней есть антитела (3) (эти антитела называ-
ются первыми), к данным антигенам (2), то во время инкубации
происходит взаимоузнавание, в результате которого образуется
принципиально значимая связь антиген/антитело (2/3).
II.После отмывки лунок от не связавшихся (а значит неспе-
цифичных) субстанций в каждую лунку добавляются так называ-
емые вторые антитела (4). Они узнают человеческие антитела
определенного типа (IgA, IgG, IgM). К этим вторым антителам
химически пришит активный фермент(Е).
Такое комплексное соединение называется коньюгат. Во
время инкубации происходит взаимоузнавание первых и вторых
антител, в результате чего в лунке образуется структура типа
"сэндвич" (2\3\4).
III.После отмывки не связавшегося коньюгата в лунку добав-
ляется бесцветный субстрат (5), на который действует фермент
(Е), в результате чего субстрат превращается в окрашенный про-
дукт (6).
IV.Количество окрашенного продукта измеряется на фото-
метре при определенной длине волны. Количество цветного про-
дукта прямо пропорционально количеству фермента в лунке, а
значит и количеству коньюгата в "сэндвиче". Время проведения
анализа от 1-го до 3-х часов. (Рис.3.).
Иммуноферментный анализ по сравнению с другими мето-
дами выявления антигенов и антител обладает следующими пре-
имуществами: высокой чувствительностью, позволяющей выяв-
лять концентрации до 0,05нг/мл чувствительность метода опре-
деляется способностью одной молекулы фермента катализиро-
вать превращение большого числа молекул субстрата, возможно-
стью использовать минимальные объемы исследуемого материа-
ла, стабильностью при хранении всех ингредиентов, необходи-
мых для проведения ИФА (до года и более), простотой проведе-
ния реакции, наличием как инструментального (в качественном и
количественном варианте), так и визуального учета; возможно-
стью автоматизации всех этапов реакции, экологической чисто-
той и безопасностью для мед. персонала (в отличии от РИА), от-
носительно низкой стоимостью диагностических наборов. Можно
проводить следующие исследования: диагностика инфекционных
заболеваний; диагностика аутоиммунных заболеваний, диагно-