Упрощенная HTML-версия
78
ствами, и полученные результаты включают всю сумму вос-
станавливающих соединений крови. В связи с этим количе-
ство «сахара» в крови получается значительно выше истин-
ного количества глюкозы, однако этот метод сохраняет свое
клиническое значение, поскольку разность между «кажу-
щимся» сахаром крови и «истинной» глюкозой (так называе-
мая остаточная редукция) у одного и того же лица является
величиной постоянной.
2. Колометрические – основаны на определении степени интен-
сивности окраски соединений, образующихся при взаимо-
действии глюкозы с определенным веществом. К ним отно-
сится орто-толуидиновый метод. Метод специфичен и точен.
3. Энзиматические – основаны на действии фермента глюкозо-
оксидазы, окисляющей глюкозу до глюконовой кислоты кис-
лородом воздуха. К ним относится глюкозооксидазный ме-
тод. Этот метод специфичен и широко применяется в клини-
ко-диагностических лабораториях.
Лабораторная работа № 2:
«О
ПРЕДЕЛЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИИ ГЛЮКОЗЫ
В КРОВИ ГЛЮКОЗООКСИДАЗНЫМ МЕТОДОМ
»
Принцип метода.
Глюкоза в присутствии фермента глюко-
зооксидазы окисляется кислородом воздуха с образованием в хо-
де реакции перекиси водорода. Образовавшийся пероксид водо-
рода в свою очередь окисляет о – толидин с образованием окра-
шенного соединения, интенсивность окраски которого пропорци-
ональна содержанию глюкозы.
Ход работы.
В две пробирки наливают по 1,8 мл раствора
антикоагулянта, затем в одну из них вносят 0,2 мл исследуемой
крови, а в другую – 0,2 мл стандартного раствора глюкозы.
Содержимое пробирок тщательно перемешивают и фильтру-
ют. Для исследования берут по 0,5 мл фильтрата и переносят в
чистые пробирки, добавляют по 4,5 мл энзимо – хромогенного
реактива (глюкозооксидаза, пероксидаза, о – толидин).
Пробы тщательно перемешивают и инкубируют в течение 25
минут при 18–25 °С. Затем их помещают в кипящую водяную ба-