где
Еоп – оптическая плотность пробы,
Ест – оптическая плотность стандарта,
Сст – концентрация стандартного раствора
Нормальные величины:
Сыворотка (реакция с реактивом Несслера) 2,5-8,3 ммоль/л
Кровь (реакция с фенолгипохлоритом) 3,3-8,3 ммоль/л
Моча (реакция с реактивом Несслера) 430-710 ммоль/сут
Практическое значение.
Уровень мочевины зависит от скорости ее синтеза в печени
и выделения через почки, а также от величины белкового катаболизма. Повышение уровня
мочевины может наблюдаться при нарушении функции почек (острые и хронические
заболевания, обтурация мочевых путей). Нарушении почечной перфузии (застойная
сердечная недостаточность), истощении запасов воды в организме (рвота, понос,
повышенный диурез или потоотделение), повышенном катаболизме белка (острый инфаркт
миокарда, стресс, ожоги, желтая атрофия печени, желудочно-кишечные кровотечения), при
диете с высоким содержанием белка. В тяжелых случаях острой почечной недостаточности
выявлено 10-кратное возрастание уровня мочевины. Так как водовыделительная функция
почек восстанавливается быстрее, чем концентрационная способность, то нормальное
выделение мочевины с мочой наступает значительно позднее, чем восстановление диуреза.
Снижение уровня мочевины отмечается при диете с низким содержанием белка, при
повышенной утилизации белка в тканях (поздние сроки беременности), тяжелых
заболеваниях печени, сопровождающихся нарушением синтеза мочевины (паренхиматозная
желтуха, цирроз печени).
Лабораторная работа №2:
«ОПРЕДЕЛЕНИЕ КРЕАТИНИНА
В СЫВОРОТКЕ КРОВИ ПО ЦВЕТНОЙ РЕАКЦИИ ЯФФЕ»
Принцип.
В результате реакции креатинина и пикриновой кислоты в щелочной среде
образуется окрашенное соединение, интенсивность окраски которого пропорциональна
концентрации креатинина.
Проведение анализа.
В две пробирки вносят по 1 мл. 10% раствора щелочи (NaOH) и
1,5 мл. 10% пикриновой кислоты. В опытную пробу добавляют 1 мл. сыворотки. В
контрольную пробу – 1 мл. дистиллированной воды. Обе пробы взболтать и оставить на 5
минут для развития окраски. Затем в обе пробы вносят 6,5 мл. дистиллированной воды.
Опытную пробу фотометрируют при зеленом светофильтре (длинна волны 500-560 нм) в
кювете против контрольной пробы. Расчет производит по калибровочному графику.
Практическое значение.
В норме концентрация креатинина в сыворотке крови
составляет: у мужчин 0,053-0,166 ммоль/л, у женщин 0,044-0,097 ммоль/л. Креатинин
образуется в мышечной ткани из креатина. Креатин, фосфорилируясь, превращается в
креатинфосфат, а из него образуется креатинин. Повышение уровня креатинина в сыворотке
крови наблюдается при почечных заболеваниях. Устойчивое повышение креатинина в крови
указывает на нарушение работы почечного фильтра. Креатинин относится к беспороговым
веществам, т.е. выделяется только клубочками и не всасывается обратно канальцами.
Повышение содержания креатинина в крови, помимо почечных заболеваний, имеет
место при кишечной непроходимости, гиперфункции надпочечников, при беременности.