Упрощенная HTML-версия
антибиотика и остатки серной кислоты, которая создает кислую среду, рН водного
раствора которого определяют потенциометрическим методом (5,0-7,0).
Обнаружение алифатической амино-группы в агликоне.
1)
Нингидриновая проба: К препарату добавляют 0,2 % раствор
нингидрина в бутиловом спирте, пиридин, нагревают в течение 5 минут,
наблюдают сине-фиолетовое окрашивание за счет образования бис-1,3-
дикетоинденин в виде аммонийной соли (конечной продукт).
Эта реакция лежит в основе спектрофотометрического метода, измеряют
оптическую плотность при длине волны 570 нм (
=570 нм).
2)
При сплавлении с натрия гидроксидом выделяется аммиак,
который обнаруживают по запаху и посинению красной лакмусовой бумажки.
Обнаружение сахарных остатков
1)
Бензидиновая проба. При нагревании препарата с конц. H
2
SO
4
(или конц. Н
3
РО
4
) до кипения, происходит гидролитическое расщепление
препарата, т.е. отщепляются моносахара, из гексозы превращаются в
гетероциклический альдегид – гидроксиметилфурфурол, который летуч и
окрашивает бумажку, смоченную бензидином в фиолетовый цвет.
2)
Реакция Молиша. К препарату добавляют
-нафтол и по стенкам
пробирки наслаивают H
2
SO
4
(конц.), в результате на границе появляется
фиолетовое кольцо, которое постепенно переходит в красный цвет. Под действие
кислоты происходит гидролитическое расщепление препарата до моносахаров и
превращение их в производное фурфурола, который вступает в реакцию с
-
нафтолом и образует окрашенное соединение.
Орциновая проба: Фармакопейная реакция для неомицина сульфата и
канамицина моносульфата.
С фенилгидразином – осадок желтого цвета
Реакция обнаружения сульфат-иона (SO
4
2-
) c помощью BaCl
2
, образуется
белый осадок бария сульфата (BaSO
4
). Эту реакцию используют для подлинности и
количественного определения:
А) гравиметрический метод - BaSO4
отфильтровывают, высушивают,
взвешивают, по разности определяют массу.
Б) Трилонометрический метод – добавляют BaCl
2
и затем оттитровывают
трилоном Б.
Физико-химические методы исследования
1)
ТСХ для определения подлинности (Rf) со свидетелями, а также
определения чистоты лекарственного препарата. На хроматограмме допускается
некоторое количество пятен и их полуколичественное содержание для примесей.
Чаще всего в качестве адсорбента используют силикагель и целлюлозу. Проявители
пары йода и спиртовые растворы нингидрина и при нагревании. Системы
растворителей (пропанол:уксусная кислота:вода) в различных соотношениях.
2)
ГЖХ используется реже, так как сахара малолетучие, поэтому
проводят их метилирование и они становятся летучими.