Упрощенная HTML-версия
Иногда в молекуле наряду с хромофорами находятся ауксохромные группы,
которые не обладают собственным поглощением, но усиливают поглощение
хромофоров. К таким группам относятся:
- NH
2
– аминогруппа,
- OH – гидроксильная группа,
- OCH
3
– метоксигруппа,
- N(CH
3
)
2
– диметиламиногруппа,
- Cl, Br, F, I –галогены.
Идентификацию веществ в условиях скрининга проводят по спектрам
поглощения. Кривая зависимости светопоглощения от длины волны называется
спектром поглощения и является качественной характеристикой вещества.
Характер спектра может меняться в зависимости от:
- природы растворителя,
- рН раствора для веществ, способных к ионизации, если молекулярная и
ионизированная формы обладают различным светопоглощением.
Получение спектров поглощения в различных условиях повышает
информативность метода.
Наряду с идентификацией веществ по характеру спектра можно провести их
количественное определение, измеряя интенсивность поглощения в области
максимума. Расчет концентрации вещества проводят по уравнению Бугера-
Ламберта-Бера:
D = Е * L * C, где
D – оптическая плотность,
Е – удельный показатель поглощения 1% раствора при толщине слоя 1 см,
L – толщина светопоглощающего слоя,
C – концентрация вещества (%).
Измерение абсорбции D проводят на спектрофотометрах различных моделей,
дающих монохроматическое излучение, т.к. закон Бера справедлив только для
монохроматического излучения.