Упрощенная HTML-версия
этом случае в качестве элюента используются смеси метанола или ацетонитрила с
водой или буферными растворами.
В качестве детекторов обычно применяют детектор с переменной (от 190 до
900 нм) или с фиксированной длиной волны. Могут быть использованы и другие
детекторы – рефрактометрический, флуорометрический, ионизационно-пламенный,
электрохимический, диодно-матричный, масс-селективный и т.п.
Выходящие из колонки вещества регистрируются на хроматограмме в виде
ряда хроматографических пиков. Идентификацию веществ проводят по параметрам
удерживания (время выхода) и спектральным отношениям на разных длинах волн
по отношению к опорной (базовой). Количественное определение проводится по
площади пика исследуемого вещества, которая прямо пропорциональна количеству
вещества в пробе. При этом предварительно строится калибровочный график с
использованием методов абсолютной градуировки или внутреннего стандарта.
Метод ВЭЖХ может быть использован в качестве общего и частного
скрининга. Он позволяет сочетать изолирование и очистку вещества с его
идентификацией и количественным определением.
Значительным преимуществом этого метода перед ГЖХ является возможность
анализа термолабильных нелетучих соединений с малой и большой молекулярной
массой. Особенно удобен метод ВЭЖХ для работы в клинических лабораториях
токсикологических центров при исследовании билогических жидкостей.
5.3.3. Спектральные скрининговые методы
Для скрининга лекарственных средств могут быть применены:
1.
Абсорбционная спектроскопия в видимой и УФ-областях спектра.
2.
ИК-спектроскопия.
3.
Спектроскопия ЯМР (ядерного магнитного резонанса).
4.
МС (масс-спектрометрия).
Из перечисленных методов наиболее широко применяется метод
абсорбционной спектроскопии в видимой и УФ-областях спектра. Это связано с его
доступностью и в то же время достаточной информативностью,
чувствительностью.