Rf является константой вещества в заданных хроматографических условиях
при их строгом соблюдении. На практике соблюдение всех условий затруднено.
Величина R
f
может колебаться в зависимости от целого ряда факторов:
- техники выполнения работы,
- качества и активности сорбента,
- толщина слоя сорбента,
- чистоты растворителей,
- степени насыщения камеры парами растворителей,
- температуры,
- присутствия балластных веществ и проч.
Поэтому иногда принято пользоваться не абсолютным, а относительным
значением R
f
, которое обозначается как
R
st
.
Относительный коэффициент
R
st
.
численно равен отношению абсолютной
величины R
f
исследуемого вещества к R
f
метчика:
R
st
= R
f
в-ва
/ R
f
метчика
В качестве метчика используется вещество, принятое за стандарт.
Относительное значение R
f
более воспроизводимо, т.к. с изменением
хроматографических условий меняются значения R
f
исследуемого веществ и
вещества-стандарта, а их соотношение остается достаточно стабильным. При
совпадении величин Rf исследуемого веществ и вещества-стандарта можно
предположить их идентичность. В условиях скрининга Rf исследуемого вещества
сравнивают с табличными данными, полученными в аналогичных условиях
Метод ТСХ широко распространен благодаря своей доступности и простоте
выполнения, и в то же время высокой эффективности, чувствительности,
экспрессности, достаточной специфичности.
ТСХ применяется в системе общего и частного скрининга и разработана для
многих лекарственных веществ, имеющих токсикологичское значение.
В общем скрининге используется множество систем растворителей, из них
можно выделить некоторые: