Расчет ведут по калибровочному графику зависимости концентрации от высоты
или площади пиков.
Возможны два варианта количественного определения: метод абсолютной
калибровки и метод с использованием внутреннего стандарта.
Более стабильные результаты дает
метод внутреннего стандарта.
При этом
наряду с исследуемым веществом вводится вещество-стандарт в известном
количестве, а при расчете учитывается соотношение высот (или площадей)
соответствующих им пиков. Несмотря на колебания в работе прибора, соотношение
высот пиков исследуемого вещества и внутреннего стандарта остается постоянным,
что позволяет получать стабильные результаты.
К внутреннему стандарту предъявляется ряд требований:
• Вещество-стандарт не должно входить в состав исследуемой смеси.
• Внутренний стандарт по химическому строению должен быть близок к
анализируемому веществу.
• Пик внутреннего стандарта должен хорошо отделяться от пика
определяемого вещества, но находиться рядом с ним (иметь близкое время
удерживания).
• Внутренний стандарт должен быть стабилен в условиях опыта.
Расчет концентрации вещества проводят по калибровочной кривой,
откладывая на оси абсцисс концентрацию, а по оси ординат - отношение высот
(или площадей) пиков исследуемого вещества и внутреннего стандарта.
Можно использовать метод расчета по котангенсу угла наклона калибровочной
кривой, который рассчитывается заранее по растворам веществ с известной
концентрацией. Метод позволяет производить расчет по рассчитанному значению
котангенса без построения калибровочного графика, и дает более точное
определение.
Аппаратурное оформление метода ГЖХ
Прибор для определения спиртов и других «летучих» ядов состоит из
следующих блоков: баллон с газом-носителем, устройство ввода пробы,
хроматографическая колонка (разделение веществ), детектор (регистрация
сигналов веществ), самописец (хроматограмма).