Упрощенная HTML-версия
Метод биохимический (энзимный, ферментативный, метод АДГ)
был
разработан в 1951г. Бюхером и Родецки и применяется, в основном, в зарубежных
лабораториях. Метод основан на реакции окисления этанола до ацетальдегида под
действием фермента алкогольдегидрогеназы (АДГ).
Акцептором водорода в реакции служит дифосфопиридин-нуклеотид (ДПН),
восстановленная форма которого обладает характерным светопоглощением при
длине волны 366 нм. Измеряя оптическую плотность продукта реакции, можно
рассчитать содержание этанола в исследуемом объекте, т.к. количество
восстановленной формы ДПН, т.е. его оптическая плотность, пропорциональны
количеству этанола. Расчет ведут по калибровочному графику, построенному по
растворам этанола с известной концентрацией.
Судебно-химическая оценка метода.
Метод чувствителен (0,1-0,2%) на уровне естественного содержаний этанола в
организме, специфичен, позволяет проводить серийные анализы, однако требует
специального оборудования и особо чистых ферментов (АДГ и ДПН), в связи с чем
в нашей стране не нашел применения.
Метод газожидкостной хроматографии (ГЖХ)
основан на переведении
этанола в более летучее соединение - этиловый эфир азотистой кислоты
(этилнитрит). Прежде, чем перейти к описанию этого метода, рассмотрим основные
его теоретические положения и аппаратурное оформление и остановимся на
преимуществах его перед химическими методами анализа.
Достоинства метода ГЖХ.
Высокая разделяющая способность, что позволяет анализировать
сложные многокомпонентные смеси. Это удобно в случаях
комбинированных отравлений суррогатами алкоголя.
Универсальность метода. Анализировать можно любые соединения
при условии их летучести и термостабильности.
Возможность качественного и количественного определения в одной
пробе.
Высокая чувствительность (10-5 – 10-9 г, т.е. на уровне
естественного содержания этанола в организме).