Упрощенная HTML-версия
Появление кроваво-красной окраски указывает на наличие цианидов в
растворе. При взбалтывании окрашенного раствора с диэтиловым эфиром окраска
переходит в эфирный слой.
Чувствительность реакции - 10 мкг
синильной кислоты в 1 мл.
Обнаружение цианидов методом микродиффузии
Метод микродиффузии обнаружения синильной кислоты и её солей основан на
реакции с пиридином и барбитуровой кислотой. Суть реакции заключается в
расщеплении пиридинового цикла при действии хлорамина Т в щелочной среде - с
образованием производного глутаконового альдегида. Производное глутаконового
альдегида малоустойчивое соединение, существующий в двух таутомерных
формах, который далее конденсируется с барбитуровой кислотой с образованием
окрашенного соединения.
В наружную камеру прибора для микродиффузии вносят 2-4 мл крови
или мочи (или 1 г гомогената ткани), прибавляют 3-4 капли 10 % раствора
кислоты серной. Во внутреннюю камеру прибора наливают 3,3 мл 0,1 моль/л
раствора натрия гидроксида. Прибор плотно закрывают крышкой и оставляют
на 3-4 ч при комнатной температуре. Затем из внутренней камеры берут 1 мл
жидкости, прибавляют 1 мл 0,1 моль/л раствора натрия гидроксида , 2 мл 1 моль/л
раствора натрия гидрофосфата и 1 мл 0,25 моль/л раствора хлорамина Т. Жидкость
взбалтывают и через 2-3 мин прибавляют 3 мл реактива, содержащего
барбитуровую кислоту и пиридин. Смесь взбалтывают и оставляют на 10 мин.
Появление красной окраски указывает на присутствие цианидов в исследуемой
жидкости.
Количественное определение
Для количественного определения изолирование синильной кислоты
проводят из отдельной навески биологического материала. Перегонку ведут до
тех пор, пока последняя порция дистиллята не перестанет давать реакции
образования берлинской лазури. При исследовании свежего биологического
материала можно использовать титриметрический метод анализа. Весовой метод
применяют к свежему и загнившему биологическому материалу.