207
7031307815011060120
В1134596012894
реакции1263596012870132195263337412487
участвуют1785596012871139202264325391462565626
следующие2447596012862132194265336439547622684
ингредиенты:3166596012876151209278341411485548623685778816
1206849012865
определяемая1559849012870146215278348411481546608697758822
ДНК24178490128191293385
вирусов28378490128162237307378438508575
в34478490128162
испытуемом36448490128171233308403465535595684754844
биологическом452384901281672413113814515095836547167788469161004
материале,8511090012889151213275345420482552615650
который15351090012868137199269339432508
предварительно20771090012875145208278345407476552613674744808883953
концентрируется;3064109001286813821328835042548755663070177183289395610201059
12061342012865
праймеры15591342012875146208282371434504597
2-х21921342012876123192
типов24201342012867142216287353
(олигонуклеотиды)28071342012852123193268326395470541607677740810871946101711111158
–39991342012878
короткие41121342012874144214285347413488550
цепочки46971342012881144218288358426501
ДНК52391342012895197290
с8511583012862
нуклеотидной9481583012881152218288350421482557629704774849
последовательностью1832158301288115021328234441548655361567673780787194510161078113912031307
комплементарной3174158301287414423430937944152959166672878985993410041079
3,-концам42881583012876436815530822243891583012847114184259334397486
каждой49101583012874135232303373448
из53931583012881137
двух8511824012871138208276
цепей11631824012883146221284358
определяемой15561824012878153223286356419489552614703774849
ДНК.24481824012896197291326
Праймеры281618240128101171234308397458528623
получают34751824012881152222292361423528589
из41001824012882138
нуклеиновых42731824012883153221291353429504574640733804
кислот51121824012876151213283353414
различных8512067012870133188258333404478572642
вирусов,152920670128149224294364425495562597
их216120670128158229
нуклеотидную242520670128159229296366428498560635707781851955
последовательность34152067012815822929236242449556563169475581788795110241095115712191283
определяют473220670128154229298361431494564629738799
методом8512308012889151213283354424512
секвенирования;13992308012862124192259321395470540609676737812887951990
12062559012865
свободные15592559012862129199270340411487580643
нуклеитиды223725590128129199266336398473534610681775
(дезоксирибонуклеозидтрифосфаты30482559012810117123429036042749056463470978085092499410601130119312631318139414651527159716721763183218951985204721092202
4-х528525590128125176245
типов8512801012861136212282348
с12342801012872
различными13402801012878141196266340411486579668742
азотистыми21182801012871126195257332394455549638712
основаниями)28662801012878141215284351413488563628716792838
–37392801012881
необходимый38552801012884146215287357426498573661755830
материал47292801012889151213275344419481551
для53152801012879150214
осуществления8513042012870133203310372434496562632693769844909
амплификации;17953042012861150225294369460536603666741815890929
12063293012865
фермент15593293012891153224313374449511
термостабильная210432930128190253323411481544604667737812883946102110831147
ДНК-полимераза328632930128224326419467542612682756845907976103910941157
–447832930128199
производит471332930128203272343417473538608680755816
достройку8513536012871142204265335405480548618
комплементарных15033536012810117126133640646855761869375581788696310571127
цепей266635360128107169243306380
ДНК308135360128129230323
из343935360128108164
пула363835360128108178247308
свободных39823536012895161232303373445520614684
нуклеотидов.470135360128109179246316378448510584655725792827
Фермент85137770128111173243332395469530
выделяют141637770128114208279342412476581642
из209137770128123179
бактерий230537770128119182250311373443517592
Thermus293337770128135205267313422489544
aquaticus351337770128110181251314352391454523577
или412737770128122193267
получают442937770128123193263333402464569631
генноинженерным5095377701281041672423173878514018012875151247309384447516591685775
методом.16614018012889149211281352421510545
Сущность11344259012894164270345415479540604
ПЦР177342590128126226304
состоит21124259012887157220280351426488
в26354259012891
том,27614259012885154244279
что30754259012895156225
определяемая33364259012895169239301372435505569632720783846
ДНК,421742590128121222316351
находящаяся460242590128100162232302374438546608673735799
в54364259012891
тестируемом8514502012861124186247322392462523612682771
биологическом165745020128122196267337406463538609671733801871960
материале,265245020128138201262324393469531602662697
подвергается338545020128124195266332395465522584646708770833
денатурации.425445020128121184258321382452520583658734808847
Затем513645020128120183244305394
праймеры8514743012875146208282371434503597
2-х148347430128120168237
типов175647430128111185260330397
в218847430128116
условиях233947430128120180250320387462526597
отжига297247430128119180276351409471
присоединяются,34794743012812419326933140046353360968374885391397510401075
вследствие458947430128116179249310382445506572646708
их533247430128124194
комплементарности,85149840128681382283023724345235856597217838529289971060112111951229
к211649840128153
3,-концам230549840128156246349540822224864984012847114184259334396485
каждой300649840128154216312384454529
из357049840128160216
антипараллельных382149840128148222284359433496565628697766828898962103611311202
цепей,505849840128160223297359434470
восстанавливая8515225012866136199261323385459522588658732799861924
на18105225012886149
этом19945225012872132202291
участке23205225012882151213275337405467
двухспиральную282252250128821492192873504255005706337037678409111014
структуру38705225012874136206276343404476544615
ДНК.45295225012896197291326
Праймеры490152250128101171234309398461530624
служат8515468012862132203297360421
«затравками»130754680128221276338400470532599667729817892962
для230454680128222293356
последующей269554680128226295358428491560630734842904979
достройки371054680128222292354416485554630697772
цепей451754680128228291365428503
ДНК,505454680128247348442477
осуществляемой8515709012870133203310372434496562632696758847917992
термостабильной18785709012812018225134141147253459666674281287695110201096
ДНК-полимеразой,3009570901281532543463954705396106857748369059681023109211681203
которая424757090128126196256327397459524
использует480657090128133195270340410474529599659721
для8515951012871142206
этой10925951012860122192266
цели13945951012875137207281
свободные17105951012862129198269339410485579641
нуклеотиды.23875951012875145212282344414476550621715750
В11346192012894
результате12636192012874137193263331394455518579641
одного19396192012875147221292349419
цикла23926192012880155223293355
ПЦР278661920128102203280
количество31016192012873143214287358420483543609679
молекул38206192012889158228290358429497
определяемой43526192012874150220283353416485549612701771846
ДНК52376192012896198290
удваивается,8516434012870140207269344410473535596659723758
то16446434012876146
есть18256434012876139200263
происходит21236434012889159229304367436506577652714
амплификация28726434012876165238309383478552620683757832896
ДНК.380364340128110211305340
Обычно419164340128102173266337412482
проводят47096434012887158228294364435500561
25–53066434012883152225
408516675012870141
повторных102766750128133203270331401470546639710
циклов177266750128133208276345414481
амплификации228866750128121210285355430520595663725799875949
и327166750128134
в344066750128125
итоге360066750128133195265323384
за402266750128114176
2–3423466750128128198268
часа453766750128129191254315
получают488766750128134203274344412475580641
миллионы8516917012889164234304379448524617
копий15046917012868138213287362
специфического19026917012862136197273348438513584646708776846904973
фрагмента29116917012891159222280368430505567629
ДНК35756917012896197290
вирусов.39006917012866140210281341412478514
ПЦР113471580128101202280
проводят144971580128174244314381451522587648
в213171580128165
0,5–1,5233071580128169205275346415451521
мл288571580128188258
микроцентрифужных31787158012818826233039947054560768174381388797910491144122013131384
пробирках459771580128173244314384460529598660730
в536271580128166
амплификаторах,851740001286215122629737146253760466772879886893110001035
которые192174000128110179241311381474537
автоматически249374000128104170232300390452513588658721782850925
регулируют345474000128110173231301369444514585688749
смену423874000128104193255330401
температуры.467274000128103165254329392462525586657725820855
Каждому8517642012894156253324394484554
из14387642012893148
3-х16227642012886134203
этапов18607642012878139202275346412
цикла23067642012894168237307369
амплификации27107642012879168243313387478552620682757832907
–36517642012889
денатурации37757642012889151226289350420489551625701775
ДНК,458576420128114215309344
отжига49627642012888150245320379440
и54377642012891