223
3831307815011060120
–851596012870
культуральные957596012868138206270331402470533603667741836899
флаконы1891596012891161222290360436530
со2457596012862131
сливным2623596012863133207274348441530
монослоем3188596012889158233303366436504567656
клеток3879596012868138200261330399
RD4313596012894194
или4541596012875145221
НЕр-2;47975960128101186256305375414
–851839012870
ФСБ9578390128111204284
без1276839012871134189
кальция1501839012867130200264337412477
и2012839012875
магния;2122839012889152209284359423461
–8511080012870
трипсин,9571080012861131206281343418492528
ростовая15191080012870140203264334401462526
среда;20801080012862132194265328367
–8511321012870
камера9571321012868130219281351413
для14041321012872142206
подсчѐта16451321012875145216278349411472534
клеток;22141321012869139200262332400438
–8511563012870
флаконы9571563012891161223291360436529
и15221563012875
пробирки16311563012875145215286361431499574
для22401563012872142206
культуры24801563012868138207270331402471565
клеток;30811563012868138200261331400438
–8511805012870
пипетки.9571805012875149225287348415491526
Во12052046012894164
время14042046012872141204293357
работы17962046012875138208279340434
с22652046012868
одной23672046012875147221291366
линией27692046012875149224299361436
клеток32402046012874144206267337405
следует36802046012868138200272342403464
полностью41792046012881151222295366427489553657
исключить48712046012881143211281386456530592656
работу8512287012870133203274336406
с12902287012863
другими13872287012872142213269344433508
клеточными19302287012868138199261331402476571659734
линиями.26992287012870145219295359447523558
Выполняют12052529012894188263333403478542647708
следующее:19492529012861131194265335439546609671710
–8512771012870
сливают95727710128104174249315378483543
ростовую153527710128111181244306375441511614
среду218427710128104174237308379
из259627710128117173
флакона280427710128132202264333402476539
с337827710128104
культурой351727710128110180248312373444512583658
клеток421127710128109180240302372441
и468727710128115
осторожно483827710128111174236305374445541616686
ополаскивают8513012012870146215286348410478552619681786847
клеточный17333012012868138200262330400475570645
монослой24133012012889158233303365435504580
ФСБ;302830120128111204283322
–8513254012870
вносят95732540128119192263326389450
во144232540128119188
флакон166532540128143213275343412487
0,25%218732540128121157227296414
раствор263532540128122184247308374443514
трипсина318332540128114183258333395469545607
(или38243254012899174245318
равные417832540128121184250324417480
части469332540128122184247308382
0,25%511132540128121156227296413
раствора8513495012870133195257323392462524
трипсина141034950128129200274349411486561623
и206734950128143
1:5000224634950128138176246316386456
раствора273734950128140202265326392462532595
Версена)336734950128161224293355418492554601
в400334950128135
ФСБ.417334950128178270351386
На459334950128170232
флакон486034950128159229291359429504
с539934950128129
культуральной8513737012868138207270331402471534604668742812888
поверхностью177437370128154225291352422492568637700761825930
25см2273837370128149219282370439
достаточно321237370128150221284345407467538608683752
0,5400037370128149184253
мл428837370128168238
раствора.456137370128148211274335401471541604639
Его523537370128164221290
равномерно8513979012870133199274344433495564639709
распределяют15943979012870133195269340402473535605670774835
по24643979012875145
слою26453979012862132201306
клеток29863979012868138200261330399
покачиванием34203979012875144213274345420487548623697760849
флакона;43043979012891161221290360435497535
–8514220012870
выдерживают9574220012872166238300370466541608671775836
флакон18344220012890161223290360435
при23044220012881151226
360С25654220012876146271241900824527574220012894
до28864220012877146
тех30684220012867129199
пор,33024220012880151220256
пока35934220012880151219281
все39094220012872134197
клетки41414220012873144206267335409
не45864220012880143
отделятся47644220012876138208270340405466527592
от53914220012876137
ростовой8514461012870141203264334401470545
поверхности143244610128176246312375445514589658721784859
(проверяют232544610128150225294364431493563627732793
под315244610128177248319
микроскопом).350644610128192266334404474536604673749818907954989
Рекомендуется453044610128180243311380469532606677748808870932997
энергично8514702012860135198268325401471545615
постучать15014702012876145208269339408470532596
по21314702012875146
стенке23124702012862124186260328391
флакона;27384702012891161223290360435497535
–8514945012870
ресуспендируют957494501281001632242943554304925686397147838549571018
клетки20104945012899169231293361436
в24814945012896
ростовой261249450128100169232294363429499574
среде32214945012891161224294357
(4,536134945012876146181251
мл389949450128119189
на412349450128104167
флакон432549450128121190252320390465
с48254945012892
ростовой495249450128100170233294363430500574
поверхностью8515186012875146212275343413489558621682746851
25см2),17365186012880149212301370417452
которая22235186012877147209278348411475
останавливает27335186012879141203265339402468537611678740802864
действие36325186012880143217280341407481543
трипсина.42105186012871141216290353428502565600
Суспензию48545186012894164224300362437493567672
всасывают8515427012866129191253348414476581642
несколько152854270128147209271339408479543610681
раз224454270128142204259
через253854270128142205275338394
тонкую296754270128133202277345415518
пастеровскую352154270128147209272333395466535602664732803906
пипетку,446154270128147223298360421489559593
чтобы508954270128142203273345439
раздробить8515669012870133188260329399471545607671
агрегаты15565669012863120189252309372433526
клеток;21185669012868138200261331399438
–8515911012870
разводят95759110128111173229295365436501562
суспензию155359110128104174235310373448504577683
клеток227059110128110180242304372441
ростовой274659110128111181243305374440511585
средой336659110128104173236306377451
до385359110128112182
нужной407059110128116187282357427502
концентрации,460759110128110179254329391466528597660734809884919
основываясь8516152012870133208278344437504566631693757
на16436152012889151
подсчѐте18306152012889158229291361424485547
клеток,24136152012882152214276346413448
или28966152012889160234
используют31666152012889150225296366430485555658719
разведение39206152012884147202269331402465540614677
1:346326152012884123193
(или48616152012860136206280
более51766152012885155225287349
высокое,8516393012866161223293361432493528
соответствующие141463930128621322022643303924535165776437128169249991061
практике25116393012875145207275337410479541
работы30866393012870133203274336429
с35506393012862
данным36476393012871133208283377465
типом41476393012863139213283372
клеток);45546393012868138200261331400447485
–8516635012870
рассевают95766350128101164226287350416478583644
полученную163666350128106175246316384448523599669772
клеточную24436635012899169231292363433508579682
суспензию31606635012894165225300363438494569674
в38696635012897
культуральные40016635012899169237302363434502565635699773868931
флаконы496766350128122192254322391466559
или8516877012875145220
пробирки,11076877012875144213285360430498573609
плотно17496877012875145215277351421
закрывают22066877012855117185254348415477582643
и28836877012875
помещают29926877012875146235296404467572632
в36606877012865
термостат37616877012860123193282351414475538599
при43936877012875146220
360С;46496877012870139479368470824548376877012894133
–8517118012870
когда9577118012891160218288351
монослой134371180128111180255325388458527602
будет19807118012894163233295357
почти23727118012897168239300374
сформирован27827118012884174244314403477547618684747820
(2–336387118012869138210281
дня),39547118012894168233280315
заменяют43047118012878139227289364429534595
ростовую49347118012891161224285354421491594
среду8517360012862133195266336
поддерживающей1221736001289917024131337444554161668374585095610191094
средой.23507360012886156219290359435470
Культуры285473600128118188256320381452520615
обычно35057360012894168263333408478
перевивают40187360012899162231293360435500562667728
каждые47817360012893155252323417479
5–752957360012894165235
дней.8517601012871147210284319