﻿266
14631067818011156112167
Прединкубируют120559601281011712343053804555235936637398098809831044
522845960128119
мин24385960128138213288
и27625960128122
строго29205960128111172241312370439
через33945960128120181250313368
10–1537975960128119189262332402
сек42345960128112174241
вносят45105960128116191260322386448
0,0549935960128119154223294
мл53225960128137207
фермента851839012891153224313374449511573
(супернатанта).1458839012860122192266329399473536597658734795858904940
В24338390128106
нем2573839012887150238
должно2846839012884153224321395464
содержаться:3346839012875144216277348444506568632694759796
печени4178839012887149220282356432
54645839012882
мг,47628390128102158194
а4991839012874
плазма5101839012886157219274363425
крови8511080012868138208275350
должна12361080012887157227324399460
быть17321080012886181243307
разведена20721080012887149205271333403466540603
1:4.27101080012885125194230
Пробы297510800128117186256327422
перемешивают34311080012892154224286375436544619686748853914
и43791080012890
по45041080012892161
истечении47011080012890153214276346408483558632
2053691080012886156
мин8511321012889164239
добавляют11261321012882151223285351421485590651
2,518121321012882117186
мл203313210128100170
этанола22371321012872133196271341412473
и27441321012887
снова28661321012874151220287349
перемешивают32501321012886148218280369431540613680742847908
стеклянной41931321012874135197264333398473548619695
палочкой.49221321012887150220289360428497572607
Затем8511563012870133194257346
добавляют123215630128120189260323389459523628689
0,1195715630128118153223
мл221515630128138208
натрия245715630128124187250320394459
сернокислого295115630128112174243318388457531593663734791860
и384715630128124
хорошо400615630128119189258329437505
перемешивают.454715630128124186256318410472580654721783888949984
После85118050128101171234304366
этого12521805012869131201258328
пробы16151805012883154223294389
помещают20411805012883153243304412474579640
на27161805012884146
3028971805012879149
мин30821805012898171246
в33631805012876
ледяную34741805012879141212277351422525
баню40351805012881144219324
для43941805012881150214
формирования46531805012891161231320394464534601663737812876
осадка.8512046012870133195266334397432
Если12052287012886148218293
инкубацию153322870128153228296367436499574649754
проводили232222870128152223292359429500574645719
в307722870128143
химических325622870128147223312386457519581649724793
пробирках,408522870128152222293364438508577638709743
то486322870128139209
перед510722870128153216286348418
помещением8512529012875146235296404467541616679767
в16542529012891
холодную17802529012894164234303375449520623
баню24372529012897159234340
их281125290128100171
содержимое30172529012887158232294363461536624694756
переносят380825290128100163234295370440503567628
в44712529012891
центрифужные45972529012899162237299369443535605700775870932
пробирки.8512771012875146215286362431500574609
Затем14952771012870133194257345
центрифугируют187527710128761382122743444185095806367117818529551016
на29262771012875137
холоде30992771012870140210279351416
2035502771012870140
мин37262771012888164238
при39992771012875144220
70042542771012870140209
g.44982771012870105
Надосадочную463827710128102163235305368430502573643718789892
жидкость8513012012897172243312381444505569
осторожно14553012012870132193263332403499575644
сливают21353012012862132206273335441502
и26723012012875
фотометрируют27813012012891161223292381443503574649719789892953
при37693012012875145221
длине40253012012872142216291353
волны44133012012866136206281374
34048233012012870139210
нм.50673012012875164199
Контрольную12053254012894164239301370439510574648719822
пробу206132540128148219289361431
(ставят252632540128120182243306372437498
для305932540128144215279
каждого337332540128141203301372442500570
образца)397932540128142214283346401475538584
проводят459832540128148218289355424495560621
как525432540128142204276
опытную,8513495012870146239301376446550584
только14713495012872142213276344414
из19203495012887142
инкубационной20963495012887162230300370432507583653727804874949
среды30803495012874143206276371
исключают34853495012887150217287392461524629690
активаторы42103495012874142202277343405466537607701
фермента494634950128102164233323385459520583
(АТФ8513737012847148233344
и12293737012882
MgCl21353373701281251952893271681379308245
)17273737012847
и18093737012881
субстрат19253737012869139209272333402465526
карбоксилирования24863737012875137207278348416478553624697768837904967104211161181
(КНСО3370237370128531462473404424145379308245
),4191373701284782
а43083737012869
соответственно44123737012869138209271337399460521583649711786860930
их53773737012882152
объему8513979012870142215277366436
вводят13203979012866132202274339400
воду.17563979012866134206277310
Расчет12054220012886155218285347449
активности16894220012884150251320381451520583684753
фермента,24774220012811517824733739846856963931184220012835
если31884220012876138209284
еѐ35074220012876137
выражают36804220012881175245307404466571632
в43464220012882
мкмолях446342200128104172260330399463534
НАД-Н,503242200128117218313362463498
окисленного8514461012870139213276346408483557627685755
за16424461012877140
118174461012892
минуту194544610128111185260331390461
инкубации24394461012898173242312382445520595670
в31444461012889
расчете32684461012892155217288350411474
на37774461012896159
139714461012893
г40994461012880
ткани42144461012884152215289364
или46134461012898168242
148904461012893
г50184461012880
белка,51334461012894157234301364398
проводят8514702012875146215282352423488549
по143547020128134203
формуле:АЕ167447020128149218289378447517579618721806
=251547020128137
Ек268747020128145212
–293647020128129
Еоп,.где310047020128145216291327362419489552
Ек368747020128144212
–393447020128129
оптическая409947020128129204266340409472534602665728
плотность486347020128133204273335409479541602666
контрольной8514945012868138213275345414485549623693768
пробы;16554945012898169238309404442
Еоп213349450128110180256
–24244945012896
оптическая25564945012893169231304375438500567630694
плотность32854945012899170241302378447510571635
опытной39554945012893169263324399469543
пробы,где45344945012899169240310404441499570633
0,152024945012894129199
–54364945012894
коэффициент8515186012868138199290380455530605667742804
для16905186012872142206
расчета19315186012872134196266328390452
на24195186012875138
125925186012871
мкМ27015186012889157282
НАД-Н;302051860128101202296345447485
0,20735415186012871107177246317
–38935186012872
оптическая40015186012871146208282352415477545608672
плотность47095186012876146216277351422483545609
0,153525186012873108177
мкМ8515427012889157282
раствора116854270128106169231292359427497560
НАД-Н176354270128137238333381482
для228054270128107177241
толщины25565427012897168238346421495590
слоя31815427012897167237302
1351854270128106
см;36595427012898187225
1000391954270128106176246316
–427154270128108
коэффициент441354270128105175236327418492567641704778840
для528854270128107177241
расчета8515669012870133195266327389451
на13375669012882144
115165669012877
г16285669012865
ткани;17285669012868136197272347385
а21495669012869
–22535669012878
количество23675669012875145215290360422484546612681
ткани30835669012868137199273348
в34675669012873
пробе,35755669012881151221292354389
мг;40065669012889146185
в42275669012873
–43355669012879
время44505669012872142204293358
инкубации,48435669012881156224294364427502577652687
мин;8515911012889164239278
Х116459110128102
–13005911012870
активность14065911012862130191265332407476539600664
фермента,21045911012891153223313375449510573608
мкмоль27465911012889157245315386449
НАД-Н/мин/г322859110128102203298346448486575651725764822
ткани.40855911012862128190266340375
Медицинское120561520128117179250320390460530592657728790
значение.203061520128186256325392454523593656691
ПирК-за275761520128233306377471517573635
является342761520128196261331395458519581646
первым410861520128206269338404499588
ферментом473061520128222284354443505580641711799
глюконеогенеза8516393012858128232300370446507578636697772835890953
в21186393012866
почках,24996393012875146217285347417452
слизистой32676393012862132208263338400462532607
оболочке41886393012870142213283352423491552
тонкого50566393012861132207274345402471
кишечника,нонаиболее8516635012868143252314384459533602664699773844918981105511281197126713291391
активен227766350128118187248323390452526
этот283966350128116177247309
фермент318366350128146208278368429504566
в378466350128122
печени.394166350128131193263325400475510
Активность448566350128157225286361428503573636697761
еѐв528066350128119181250
тканях8516877012861130192267332401
определяют12886877012886161230293365426497561666727
при20506877012891161236
исследовании23216877012892155217287349419489556618693767843
механизмов319968770128104166236299373449504593662729
развития39636877012886148203270344406480544
ряда45436877012886150222285
процессов,48636877012890161230306367430492561628663
связанных8517118012862129193249311386460555624
с15117118012898
нарушением164471180128111174243313420482557633694783
энергообеспечения24627118012896171233303361430500571634696770832903965104011151180
организма,действия3677711801281051752332953704445005896516867578198949571018108411591223
лекарств,493571180128106168236298368430492558593
токсических8517360012861132200262337407470531599674744
веществ16317360012866128236298359421486
и21527360012875
др.22637360012871141177