289
14531067818011156112167
последующиеизмерения8515960128751462082783414114815846927678299059611050111211811243131813941458
–через152344596012870141203273335390460530
сек.2909596012863125193228
Контроль1205839012894164240301370440510574
ставят1814839012892153215282346408
к2257839012897
каждой2389839012897159257327398472
пробе.28978390128104174245315378413
Им33458390128131219
служит3601839012891161231326401463
проба40998390128104175246316379
без45138390128100163218
активаторов4766839012891159221296362425486555624695762
(АТФ8511080012847148233344
и122910800128141
MgCl21405108001281912613553941799113508245
)18451080012847
и192710800128141
карбоксилирующего21021080012813419626633840847653861368475782889810011109117112291299
агента343710800128128185248322383446
–391810800128137
КНСО34091108001281592613544544544113508245
.45901080012835
Вместо466010800128159248310373434504
этих520010800128125187260330
растворов8511321012870133195257323392462532599
вносят14851321012899172243306369431
такие19511321012894155223299361
же234613210128131193
объемы257413210128102173246308397491
воды.31001321012899169240335370
Остальные350513210128134196257320390453527622684
процедуры422313210128108178248322385456527595690
–как494713210128108175238306
и528813210128107
в54311321012899
опытной8511563012870146239301376445520
пробе.14061563012876145215286349384
Расчет12051805012886155218285347449
активности168918050128161226327397458528597660760830
фермента.25551805012819025232241147454464571532721805012835
Еѐ334218050128176237
выражают361418050128157252322385481543648709
в435818050128158
мкМ455118050128179248372
НАД-Н,495818050128193293389436537572
окисленного8512046012870139213276346408483557627685755
за16422046012874136
118122046012889
мин193620460128108182257
инкубации22292046012892168235306375438513589663
129302046012889
граммом30552046012875145207294383453543
ткани36332046012880147209284359
или40272046012894164238
же430020460128116178
в45122046012886
расчете46332046012888151214284346409472
на51402046012894155
153302046012889
г54552046012875
белка.8512287012871134204273335370
Для125622870128109179244
расчета15352287012884147209280341403465
берут20352287012885148217288347
разность24182287012885148203278348411472536
оптических29882287012886160222296366429491559634703
плотностей,37272287012889159229291364435498559620695730
полученных44922287012890160231300369432507582676746
за52732287012871133
154412287012884
минуту8512529012889164239310370440
инкубации,13252529012890166234305374437512587662697
в20572529012880
течение21722529012877139210272347422484
которой26912529012884153215285354424500
происходит32262529012889160229305366437506577653714
ее39752529012878140
линейное41502529012885159234297371446516579
изменение47642529012890146235295370433507582644
в54432529012882
опытной8512771012870146239301376445520
и140627710128115
контрольной155627710128107178252314384454523587662732808
пробах:∆Е239927710128114184253325388457496584670
=310427710128118
∆Еоп325627710128126212282357
–364927710128109
Ек,379427710128125193228
где40572771012897168231
∆Еоп432327710128126211281356
–471427710128110
изменение486027710128114170259321395458532607670
оптической8513012012870146207281352414476544613689
плотности157530120128134204272334409479540602677
опытной228730120128129204298360433504581
пробы290330120128134203274345439
за337730120128114176
1358830120128129
минуту375230120128147222298368428499
инкубации;428430120128134211279349419482557631707745
∆Ек506530120128147233301
–540130120128129
изменение8513254012875131220282357419494568631
оптической15173254012870144206280350413475543612687
плотности22383254012875146215277351421484544619
контрольной28933254012868137213274343413483547621692766
пробы36953254012875144214286379
за41103254012855117
142623254012870
мин43673254012889163238
инкубации.46393254012875151219289359422497572646681
Полученную120534950128101171241311380442518593664767
разницу200634950128127189245320395470540
(∆Е)258034950128102190276322
используют293734950128131194269339409473528598702763
в373534950128122
дальнейших389234950128127191261325399462537645720789
расчетах471634950128126189251321383444507577
по532834950128130200
формуле:Х8513737012891161231320390459521560662
=15483737012879
((∆Е1662373701284894180266
х19623737012872
0,1/0,207)20703737012869105175213284320388458528576
х26803737012870
1000)27853737012871141210281328
/а,31483737012840103138
где33203737012858130193
0,135473737012870106175
–37573737012871
коэффициент38643737012869138199290379455529605666741803
для47023737012871142206
пересчета49433737012875137207270332403465525586
на8513979012875138
мкМ102439790128130198323
НАДН;138239790128143244339441480
0,207189739790128112148216287356
–228939790128113
оптическая243839790128111186248322393455517585647712
плотность318539790128116186256318391462525586650
0,1387039790128110146216
мкМ412139790128131199324
р-ра447939790128111161231294
НАДН480839790128143244339441
для528439790128112183246
толщины8514220012861132202310385459554
слоя14404220012899169238303
1177842200128107
см;19214220012899186225
1000218242200128107177247317
–253442200128109
коэффициент267942200128105175235326416491566640703778839
для355442200128106177241
расчета383042200128107170232302364426488
на435342200128112174
1456242200128107
г47044220012895
ткани;48344220012898166228304378417
а52874220012899
–542142200128109
количество8514461012868138209284354416478540606675
ткани15614461012862131193268343
в19394461012867
пробе,20414461012876146216287349384
мг;24614461012889147186
Х268344610128101
–28194461012873
активность29284461012863131192266333407477540601665
фермента,36284461012891153223312374449510573608
мкмоль42714461012889157245315386450
НАДН/мин/г475644610128101202297399438527602676716773
ткани.8514702012861130192267341377
Рассчитывают12054945012878140203265336410472566632695799861
активность21014945012885152213288354429499562623687
фермента282349450128112174245334396471532593
на34524945012897160
136464945012892
г37744945012880
белкапо38894945012892155225293356431502
формуле:У442649450128112183253342412480542581682
=514349450128102
Х528049450128124
х54384945012892
1000/С,8515186012870141210280320414449
где13355186012888159221
Х159151860128132
–175851860128102
активность18955186012894162223299365440510572634698
фермента,262751860128122184254343406481542603638
рассчитанная330051860128101164226289359433495557632707769834
на416951860128106168
1437251860128101
г45085186012888
ткани;46315186012892160223298373413
1000507951860128101171241311
–542651860128104
коэффициент8515427012868138199290380455530605667742804
для16885427012871142206
расчета19295427012870133194265327389451
на24155427012875137
125875427012870
г26925427012858
белка,27835427012872135205273335370
С31885427012894
–33165427012870
содержание34225427012862132203266335433495569644706
белка41635427012872134204272333
в45305427012867
146315427012870
г47375427012857
ткани,48295427012862130192267342377
мг.52405427012889147182
Второй12055669012894155225295365440
способ16815669012872147217280349420
отличается21365669012881143213287357419482543605670
от28415669012880142
вышеописанного301856690128781722803414114865616236847598359049621031
тем,40855669012872135224259
что43795669012881142211
реакцию46265669012880144205272347423528
ведут51895669012876139209279339
в8515911012866
пробирках95259110128119190260332406477544607676
и166359110128119
останавливают181859110128114177238299374437503573648714777881942
ее279559110128106169
по299959110128118188
способу,322359110128105180251312383453524557
описанномудля381559110128114190265328390464540609697768837908972
глюкозо-6фосфатдегидрогеназы.4822591101281021762813484194755455926628516152012891161224314376438508571628704774844915972103411091171122613211357
Реактивы.12056393012886148218284385456516611646
Дополнительно19246393012896165241310380455530591654724787862931
к289163930128106
реактивам,303163930128108171232300362436502565652687
используемым375363930128113176250320391454509579640729823912
в470063930128104
способе483863930128100175245308377449511
1,538363930128108144
используют:8516635012875138213282353416471542644705744
1.16316635012870105
Этанол17716635012893154216291362432
96%;22386635012870139257295
2.25696635012870105
Натрий270966350128102163224293369443
сернокислый31886635012862123193269338407481544614707782
10%40046635012870141258
(вес/объем).42976635012846113174236275345416489551640687722
Ход12056877012886155227
определения.14676877012879150219282353416477538607678743779
В22906877012894
центрифужные24196877012884147222284352427518588684759854917
химические33716877012879155244318388451513581656719
пробиркивносят41256877012883154223294370439508582649722793855919980
0,451406877012880115184
мл53606877012898168
буферного8517118012871142231294364440509567636
р-ра,15237118012870118188249285
по18437118012875145
0,320237118012871106176
мл22347118012889159
р-ров24287118012871119188257324
натрия27877118012875138199269344408
пировинограднокислого,3230711801287515021929035743050657563370276583591198110491123118612551325138314531488
АТФ,475471180128101187297331
MgCl25121711801281251942883275450717308245
,54967118012835
КНСО38517360012894195288389459
и13467360012878
НАДН,146373600128101202297398433
0,0519317360012873109179249
мл22197360012889159
воды24137360012869140210305
(в27537360012850117
случае29057360012865135205274336399
если33407360012865127198273
конечный36487360012871142216279350424518593
объем42767360012873144216278367
кюветы46787360012871176242304366460
251737360012874
мл),52867360012888158205240
ставят8517601012862124186252317378
в12647601012866
водяной13657601012866136208272347417491
термостат18927601012861123192281351414475537599
при25257601012875145219
температуре27807601012861123212287349419481542612681743
300С.35597601012870141370075710824537457601012894129