234
14231067818011156112167
интенсивности851596012875151212274348411485551627696759820894
окислениявосстановленного206159601287013921327634640848355762268875782088294410061080115012161285134714221498156716251694
цитохрома4071596012875150211281351420490579642
ЦхО-ой,50285960128101171273323392468503
содерожащейся851839012862133203266336406503565673735809872937
в18238390128231
исследуемом20878390128239302364434497568638699788858947
р-ре.30708390128233281351413448
Окисление35538390128265333408471541603677752814
сопровождается44018390128226296372442511578648744816879940100110641128
уменьшением8511080012870157220295359467529604680742831
оптической17161080012870146208281352413476544614689
плотности24401080012876146215276351421484545619
при30941080012875145219
55033481080012871140211
нм:35931080012875164202
412051321012870
Восстановленный13111321012810517423729936142349756763370376584091510091084
цитохром24301321012886162224292362433502592
С30671321012894
+31961321012890
О23333132101281013435137708245
+35151321012891
436401321012882
Н+ЦхООкисленныйцитохром3769132101281013870129108251392013210128101171273374441517579650712785860953102911041179124113101379145015201609
С8511563012894
+9801563012879
Н21093156301281021194161808245
О.124015630128101136
Реактивы.12051805012886148218284385456516611646
1.1205204601287012762046012835
0,213452046012870106176
М155520460128125
калий-фосфатный1715204601286813020027534939748855762071077183390810021077
буферный28272046012872142232294364439533608
р-р34692046012870118187
(рН36922046012846117218
7,4).39432046012871106176223258
2.Р-р12052287012870106184230301
восстановленного154022870128128199261322384446521591657727789863937100810661135
цитохрома271122870128135211272341411482551640703
С:344822870128155193
8367622870128133
мг384322870128151208
в408722870128128
1425022870128131
мл0,2441622870128150220289325395
М484522870128187
калийфосфатного5067228701281301932633374128512529012891161224314376438513583641710
буферного15962529012872142231294364439508566636
р-ра22662529012871119188251
(р-р25522529012846115163233
1).28192529012870117153
3.12052771012870106
3,2%13462771012894130200317
р-р16982771012895143212
гидросульфита19462771012882157228298368431500569633723799860923
натрия290427710128100162224294368433
вприготовленном337227710128931682383133714405025716377077698449199901078
непосредственно4485277101281001632383083704395025746356977638259009751044
перед8513012012875138208270341
употреблением12283012012892166236298367429500570632707782844932
фосфатном219530120128113184247336399460534605694
буферном29243012012893163252315385461530619
р-ре.35793012012891142212274309
Предварительно3923301201281231932563263934555245996607237938569311000
проводят49593012012897167237304373444509570
восстановлениецитохрома8513254012866136199261323385459529596666728802877939101510891151122112901361143115201582
С.246732540128162197
Для269932540128163233298
этого303132540128128189260316386
8345332540128137
мг362532540128157215
его387432540128130188257
растворяют416632540128137203265326391462532596701762
в496332540128134
1513232540128137
мл530532540128156225
фосфатного8513495012891161224314376438513583641710
буферного159634950128125196285347417493564622691
р-ра.232234950128124173243305340
Обычно269734950128156227322392467537
после326834950128130201263333396
этого369934950128115176245303372
оптическая410634950128125200261335405467530598661724
плотность486534950128130201269331406475538599663
раствора8513737012870133195257323392462524
цитохрома14103737012875150211281351422491580642
С20863737012893
при22143737012875145220
55024703737012870140211
нм27143737012876165
возрастает29143737012866136192260323384446508570632
более,35803737012872141212274336371
чем39863737012870133222
в42433737012866
243423737012870
раза.44483737012870132188250285
4.Среда12053979012870106199270331402465
для17053979012877148212
выделения19523979012873168239302372434508583648
митохондрий26423979012889163225295364434510580650725800
из34773979012882137
ткани36493979012868136198273349
следующего40333979012869139202273343447555617674745
состава48123979012869139202264326392455
(рН53023979012853123225
7,4):8514220012870106176223261
0,22511474220012898133203273342
М152542200128153
маннитол,171242200128117180253329403465535605640
0,075М23874220012897133203272342467
сахароза,28894220012891152222284354424480542577
0,1мМ35014220012897133203292415
ЭДТА395242200128121216302403
(готовят43904220012875131201263333400463524
накануне495042200128102165233295369440513576
опыта8514461012870146239301363
и12494461012876
до13584461012872141
использования15354461012875137211282352416471540605668743818882
хранят24524461012870140203277342403
в28904461012866
холодильнике).29914461012870139210280351426496560635709778840886921
5.12054702012870106
Среда13454702012894164227297360
для17394702012871142206
разрушения19804702012870132187258328434497572647711
митохондрий27264702012889164226295364435511582652726802
–35624702012871
0,33%36674702012870105176245362
раствор40644702012870132195256323391461
дезоксихолата.45604702012872134190259326389464534604675737798859894
Приготовление120549440128101171242296366468536598659721791860923
исследуемого216349440128135197260320382453516578668737792862
р-ра.306049440128136184255324360
1345549450128136
г362649450128123
печени378449450128140203274336411486
гомогенизируют4305494501281231932823524094715456216767508218919941055
в539549450128132
четырѐх8515186012871133194289358421490
объѐмах13775186012879151224286374437506
среде19185186012873142204275338
выделения.22915186012877170242303373436511585650685
Гомогенат30115186012890161250319377439513576637
центрифугируют368351860128851472222843534275195896457207918609651025
при47445186012885155231
150050095186012885155225295
g53405186012879
в54555186012875
течение8515427012861124194257332406469
15135554270128139209
мин.160054270128159234308344
Для197954270128166236300
разрушения231454270128141203258328399505568643718782
выделенных313154270128137230302364434497570645739809
митохондрий397554270128160233295365435504579651720796870
к488154270128138
осадку505354270128141203265336404474
добавляют8515669012871142213276342412476581642
1152856690128144
мл170856690128162233
0,33%197556690128144180250319437
раствора244656690128144207270333399467537600
дезоксихолата.После30815669012814520726233340146453860767874881087193496910701138120112711334
окончания444856690128144213283358429491565641704
этой518856690128134195266340
процедуры8515911012875146215291352424494563658
пробы15425911012876146216287381
центрифугируют195759110128751372122743444185105806367117828529551016
2530085911012870141
минут31835911012889164239310369
при35875911012875146220
1800038435911012870139210279349
g.42275911012871106
Ход12056152012886155227
определения.Втермостатируемую1723615201287014021027334440546652959866773276724916152012894155217288377447509570632694769838909969105811281233
при40146152012875146220
250С45266152012870140466861220824547126152012894
кювету50966152012868173239301363434
спектрофотометра851639301286213720026833039946956062969176184991297310431105
вносят2,9199163930128149224294357420482552588656
мл268363930128171241
р-ра295963930128152201270333
восстановленного332663930128149219281344405468543612679749811885960103010881157
цитохрома451863930128157232294364434503574662725
Си527863930128176251
измеряют8516635012875131220282351416521582
оптическую146866350128171246308383453515577645715818
плотность232166350128176247316378453524587648712
при306866350128175245320
550342466350128170240310
нм.377066350128175265300
После410566350128205275338407469
стабилизации460966350128164225287359433504578634696770846920
температуры8516877012861124213288350419482543614682777
раствора166368770128168231294355420490560623
при250С232268770128173242318387457278168470824528266877012894
вносят295568770128165239308371436497
0,1348868770128168205275
мл379868770128187257
исследуемого409068770128174236299368430501572632721791849919
лизата504568770128169244300361422484
митохондрий,8517118012889164225296366435511581651726801836
перемешивают172271180128122184253316404466574649716778883944
содержимое270171180128108178249311381478553641711774
кюветы351071180128115220286348409502
и405071180128121
измерят420771180128121177266327397462523
оптическую476571180128116191253327398460521590660763
плотностькаждые851736001287514521527735142148454560967673883590610011062
3019487360012877147
сек21317360012869131199
в23657360012874
течение524747360012868130201263338413475544
мин.30607360012889164239274
В33797360012893
качестве35077360012875138208271333395461523
контроля40657360012875145220282350420490555
используют46557360012882145218289359423478548651712
рр,540273600128778517601012870106
в9927601012866
которых10937601012867138199268339433503
вместо16317601012866155217280341410
лизата20767601012870145201263324387
митохондрий24977601012889164225295364435509581651725802
вносят33337601012867141212274338399
0,137677601012871106175
мл39777601012889159
среды41707601012863133195266360
выделения45657601012866160231294364426501575640
их.52397601012875145181