﻿224
13731067818011156112167
Ход1205596012886155227
работы.146759601281402102813504525462014596012835
В20845960128164
кювету22835960128139242308371432502
с28185960128133
длиной29865960128142212287363433508
хода35295960128139210281344
луча39085960128140210279341
2,542845960128141177247
мл45665960128158228
вносят1мл48295960128136212282345408470540628698
фосфатного851839012891161224314376438513583641710
буферного1596839012874144233296366441510568638
р-ра,2270839012871120189251287
0,0022592839012872107177247316
мл2946839012889159
р-ра3139839012872121190253
НАД34298390128101202297
и3763839012876
0,53874839012872108178
мл4090839012889159
исследуемого4285839012875137199268330402472533622692750820
лизата5141839012872147202265326388
митохондрий.8511080012889164225296366435510581651726801837
Доводят172310800128168238305374446510571
объѐм232910800128143214287349438
до280210800128144215
4305210800128142
мл322910800128161231
с349510800128135
учѐтом366510800128144213275337407496
внесения419610800128139214277339401477552616
фермента.484710800128164227296385448522583646681
Содержимое8511321012894164236297368464539629698760
перемешивают16461321012892155224286375436544620686748853914
и25951321012893
по27231321012891161
истечении29201321012892155216277347409484559634
3-435901321012886137206
мин383113210128107182256
измеряют41221321012894150238299368433538599
значение47571321012872147210279342416491554
Е15347132101281045449137708245
.54951321012835
Добавляют8511563012896166237300366436500605666
маладегидрогеназу1553156301281422042743364074695276016737428128709331008106911251195
и278115630128129
через294615630128124186256319374
5335515630128123
мин351415630128142217293
измеряют384215630128128184272335404469573635
значение451015630128109184247317380454529592
Е25140156301281395279161808245
.По53241563012835136206
окончании8511805012870139208284354416491566641
реакции152718050128130193255322397472547
повторно210918050128136206273334404474548619
вводят276318050128127194262334398459
фермент325618050128152214285374436510572
и386318050128136
измеряют403418050128140196284345415479584646
значение471518050128116191253324386460536598
Е.535018050128146181
Содержание8512046012894164236297368464526600676739
малатарассчитывают,16232046012810316523529735942149055361567774782288497710441106121112721307
исходя29642046012888150220290361426
из34252046012887142
данных∆Е36022046012883146221295390460545631
=42672046012892
(Е1439520460128591444541210108245
-Е2458620460128471334718210108245
)47642046012847
–48462046012882
(Е2496320460128601465108210108245
–51892046012882
Е3530720460128985403210108245
).5449204601284782
При85122870128101171247
использовании113322870128149212286356427490545614681743818892967
кюветы213522870128142247313375437531
с270122870128137
длиной287322870128145216290365434510
хода341822870128144214285348
луча380122870128144214282345
2,5418122870128144180250
см446622870128137226
необходимо472722870128149211282354423493565639728797
учитывать,8512529012870139214276370437499560624659
что154525290128104165235
изменение181625290128108164253315391453527603665
оптической251625290128104179240314385447509577647722
плотности327225290128108179248310385455518579654
0,39396125290128104139208278
соответствует42742529012896166235297364425487549610677747807868
0,100517725290128104139210280350
мкмоль8512771012889157246316387450
НАД-Н.В133627710128158259354402503538631
качестве200227710128124187257320382444510572
бланка260827710128128199261335403466
используют310827710128132194269339410473528599701762
кювету,390527710128126231297359420490525
не446527710128133195
содержащую469527710128119189260323392489551659730833
исследуемый8513012012875138200270332403473534623717792
экстракт16793012012860128190251320383450512
ткани.22263012012861129191266341376
Медицинское120532530128117179250320390460530592657728790
значение.Малат2378325301285512419426132439346252529053254012835160221291353414
является37013254012865131201265327389451516
предпоследним46003254012875146208279354424486557619689764839927
метаболитомцикла851349501288915121327534641648656162369178185593099810681130
трикарбоновых20163495012863132207275337407479548624693760854923
кислот,29753495012869144206276346407443
окисляющимся34533495012871139214276346411516623698790851915
до44033495012873142
оксалоацетата45813495012872140203265335404467541603665727788851
с54663495012864
восстановлением85137370128661361992613233854595295966667288028779391028
НАД.191437370128206307402437
Содержание238837370128200270342405474571633708782845
его326737370128169227297
в360037370128173
тканях380837370128167235298373437507
определяют435137370128175251320383453516586651755816
при520237370128181251327
исследовании8513979012875138200270332403473540602676750826
механизмов17143979012889151220283357431487576646712
развития24623979012870133189255330391465530
ряда30273979012871136207269
процессов,33323979012875146216291353415477547613648
связанных40153979012864130195251313392466560630
с46813979012864
нарушением47813979012875138207278384446521597659748
энергообеспечения8514220012860135198268325396465537599661736798868931100510801144
организма,действия20304220012871141199260335410466555617652722784859921982104911241188
лекарств,32524220012870132201263333396458524559
токсических38454220012862130199261335406469531598672745
веществ46264220012866128236297360421487
и51484220012875
др.52574220012871142177
5.12.12934707012670106176245281
Определение160947070126109190267330401463540603684765826
активностималатдегидрогеназы(МалДГ)247047070126701512203023774585275896587398339049821053112111941255131813991470154816181682174418251895195120602107223923092387248325722618
вмитохондриях16354949012676171252321391461531612683761842917987
по26584949012681150
скорости28444949012661142212290360422491572
образования34504949012670141219288345414490560640721796
НАД-Н428149490126110211307354463
Принцип.120551860128101171242312381450521556
Данный18635186012896158233308402477
фермент237451860128158220290379441516577
катализирует298651860128135197259320390465520594665735796857
реакцию387851860128137200262329404479584
дегидрирования4497518601281372002563314034755506206907578198939681033
яблочной8515427012865136207276347422491566
кислоты14525427012868144206276345407501
с19885427012862
переходом20845427012875137208271340409481551640
ионов27585427012875145220289356
водорода31495427012866136207278347417488551
на37345427012875138
кофермент39085427012868137229291360450512586647
НАД:459054270128101202297336
Малат120556690128125187257320381
+16205669012879
НАДМалат173456690128102202298423485555618679
ДГОксалоацетат24465669012896177279347409471541610673748810871933995
+34765669012879
НАД-Н+Н+.358956690128101202297344445524625421456390825142645669012835
Реакция12055911012878140203271346421486
практически172659110128144214276346407481552614676744819
необратима258159110128144207277348417480542617705767
и338359110128146
об356359110128141212
активностиНАД-зависимой38115911012813120126333640347854761067174684894810431091114612091275135014121486157516441719
МалДГ85161520128125187257353434
судят13206152012867137207272334
по16896152012879149
скоростиобразования1873615201286713520527434540746854361368575581787394210091071114512201285
НАД-Н319961520128101201296343444
в36786152012871
присутствии37836152012880150226289359419481543609684758
ионов45766152012880149225294361
марганца49766152012889151222279341416491553
и8516393012875
АМФ.96163930128102226337371
Реактивы:12056634012886148218284385456516611657
1.12056877012870106
Среда13486877012893163226296359
для17426877012874144208
выделения19856877012869163234296367429502578643
митохондрий26656877012889163224294364434509580650725799
из35026877012875131
ткани36666877012864132194269345
следующего40466877012865135197268339442550612670740
состава48216877012865135198259321388450
(рН53066877012849118219
7,4):8517118012870106176223261
0,22511477118012898133203273342
М152571180128153
маннитол,171271180128117180253329403465535605640
0,075М23877118012897133203272342467
сахароза,28897118012891152222284354424480542577
0,1мМ35017118012897133203292415
ЭДТА395271180128121216302403
(готовят43907118012875131201263333400463524
накануне495071180128102165233295369440513576
опыта8517360012870146239301363
и12497360012876
до13587360012872141
использования15357360012875137211282352416471540605668743818882
хранят24527360012870140203277342403
в28907360012866
холодильнике);29917360012870139210280351426496560635709778840886925
2.12057601012870106
Среда13457601012894164227297360
для17397601012871142206
разрушения19807601012870132187257328434497572647711
митохондрий27267601012889164225295364435509581651725801
–35627601012871
0,33%36677601012870105176245362
раствор40647601012870132195256323391461
дезоксихолата.45607601012872134190259326389464534604675738799860895