184
13631067818011156112167
развития851596012870133188255329391465530
ряда14165960128143208278341
процессов,17925960128149219288364427488550619686721
связанных25485960128138204269324386462536631700
с32845960128137
нарушением34565960128149211280351457520595670732821
энергообеспечения431259601281332082703403984685386096717338098709411003107811531217
организма,действием8518390128701411992603354104655546166527217848599219821048112311861274
лекарств,2160839012870131200262332395457523558
токсических2752839012863131200262337407470531599674744
веществ3532839012866128236298361422488
и4054839012875
др.4165839012871140176
5.11.10931326012670106176245281
Определение140913260126109190267330401463540603684765826
содержания22701326012663133204266344446515597677752
малата30571326012696165244314382452
вбиологическом354413260126761462272953754445085896687307928739421038
материале46161326012696166235297375456525604667
ферментативным2344156701269715823633239447654461568376584092110301125
методом35031567012696158227297368437533
Принцип.Определение120518050128101171242312381450521556176218050128101176245308379441512574648722785
проводят29631805012875145214281351422487548
с39261805012862
при44051805012875146220
помощи50411805012875146235304412486
ферментамалатдегидрогеназы(МалДГ)85120460128911532243133744495115736617237938559179881050110711831253132413941452151415881651170617991846197120332103219922792326
посредством32122046012875145208277340410473535601669759
следующей40062046012862132194264335439547609684
реакции:47262046012870132194262336411486525
Малат120522870128125187257320381
+16202287012879
НАДМалДГОксалоацетат173422870128102202298423485555651731833900963102510951165122713021365142614871549
+33172287012880
НАД-Н+Н+.343222870128101202297344445524625405722570825141072287012835
Равновесие12052529012878140207282352419480542617679
реакции191925290128116177240308382458532
сдвинуто248625290128108178245320394465524594
вправо,311625290128111186257319387457491
что364225290128116177247
позволяет392525290128119188244310380451515577638
количественно459725290128114183253327398460523584650713787862932
определить8512771012870146215278348411481556618682
малат.156727710128222284354416478513
Образование1211327710128235306377440495565631694768843905975
моляоксалоацетата31242771012822029136142649556462668975982789096410271088115112121274
сопровождается44322771012819526534141148154861771478584791097110321097
образованием8513012012870142212275330399465528603677740829
1моляНАД-Н.17143012012870159228299363464565660707808843
Ход12053253012886155227
работы14663253012871140211281382477
Выделение12053495012886180251313374437506576639
экстракта20593495012862127189291361430496598668
митохондрий.2943349501289015926133039246253360467274281237573495012835
Его40063495012886143213
получаютметодом4434349501287514521528535441752258467273479686693610071095
дифференцированного8513737012871147237328391460523597672747817887953101610891165123412921362
центрифугирования2249373701281011642393013694445356066627378078779441005108011551219
в35033737012894
среде36323737012889159222293355
выделения,40223737012894188259322392452528603667702
содержащей47593737012890160231293363460522630692767
0,2258513979012870106176245316
М120839790128125
маннитола,13733979012889152225301375437507577641676
0,07520833979012876111181251322
М244639790128124
сахарозы26063979012867130200263332402457552
и31943979012881
0,1мМ33093979012876112182271396
ЭДТА.Навеску37453979012893189275375410511573639701764832902
ткани46813979012867135197272348
около50643979012876145215286354
154543979012874
г8514220012858
гомогенизируют94442200128701402303003584194945696246997698399421003
в19824220012879
4-кратном20974220012883132200270332394469538627
объеме27594220012883154227289378440
буферного32344220012883154243305376452521579648
раствора.39184220012883145208269335404474536570
Для45364220012896166230
разрушения48014220012883146202272342449511586662726
выделенных8514461012866161232295365427501576670739
митохондрий162644610128201277339407477548622693764838913
к257544610128180
осадку279044610128183246307379446515
добавляют334044610128184254326389455525589694756
1413144610128182
мл434844610128200270
0,33%465344610128182218288358476
р-ра516444610128182233302365
дезоксихолата,8514702012871134190260327390464534604674736798860895
содержащего178147020128154223294356426524586693755813882
1269847020128163
мг289547020128181238
сывороточного316947020128153247314384453523585655725800870927997
альбумина.420147020128154224287358429516591666729764
Осадок500047020128193258320392462530
митохондрий8514945012889164225296366435510581651726801
суспендируют168749450128122192253328391466538613684754858918
в264149450128125
среде280149450128122192255326389
выделения322549450128126221292355425487561636700
и396049450128135
затем413149450128115177238301390
подвергают455649450128134204276343404474532594698760
3кратному5350494501281308515186012868138201263337407495566
замораживанию-оттаиванию.1450518601281081702593293994625596347007628389121017106411351196125813191394146015231596167217771810
После329651860128153223285355418
окончания374951860128122191260335405468542617681
этой446451860128113174244320
процедуры481951860128126197267341404475546614708
пробы8515427012875146215286381
центрифугируют126654270128751372132743434185105806367117828529561017
2523185427012870141
минут24945427012889164238309368
при28975427012875145221
1800031525427012870140210280350
g.35375427012870105
Проведение120556690128101171242308371441503577653715
ферментативной19545669012891153224313375450510573634709775851920996
реакции.29835669012871133196263338413488523
1.12055911012870106
Среда13485911012893163226296359
для17425911012874144208
выделения19855911012869163234296367429502578643
митохондрий26655911012889163224294364434509580650725799
из35025911012875131
ткани36665911012864132194269345
следующего40465911012865135197268339442550612670740
состава48215911012865135198259321388450
(рН53065911012849118219
7,4):8516152012870106176223261
0,22511476152012898133203273342
М152561520128153
маннитол,171261520128117180253329403465535605640
0,075М23876152012897133203272342467
сахароза,28896152012891152222284354424480542577
0,1мМ35016152012897133203292415
ЭДТА395261520128121216302403
(готовят43906152012875131201263333400463524
накануне495061520128102165233295369440513576
опыта8516393012870146239301363
и12496393012876
до13586393012872141
использования15356393012875137211282352416471540605668743818882
хранят24526393012870140203277342403
в28906393012866
холодильнике);29916393012870139210280351426496560635709778840886925
2.12056635012870106
Среда13456635012894164227297360
для17396635012871142206
разрушения19806635012870132187258328434497572647711
митохондрий27266635012889164226295364435510581651725801
–35626635012871
0,33%36676635012870105176245362
раствор40646635012870132195256323391461
дезоксихолата.45606635012872134190259326389464534604675737798859894
3.12056877012870106
0,113456877012870106176
М155568770128125
фосфатного17156877012891161223314376437512581639709
буферного24596877012872142232294364440509567638
р-ра31316877012870118187250
(рН34166877012847116217
7,2).36686877012870105175223258
4.0,0212057118012870106176211280351
М159171180128125
р-р17497118012870118188
MnS041972711801281251952733432314717308245
.23607118012835
5.12057360012870106
0,00513457360012871106176246315
М169673600128125
р-р18557360012871117187
НАД.207873600128101202297332
6.12057601012870106
Малатдегидрогеназа1345760101281251882583203814525145716477177878589169771053111411701232
(0,426127601012846117152223
Е28707601012885
на29907601012875136
кювету).31627601012868173238301362432478513