﻿209
13331067818011156112167
процессов,851596012875146215291352415477546613648
связанных1534596012863130194250312386461555625
с2196596012862
нарушением2294596012875136206277384446521595658747
энергообеспечения3076596012861135196266325394464535598660734797866929100410791143
организма,действием42555960128701391962593344094655526156507237868609229841050112411861275
лекарств,851839012870132200263333396457523559
токсических1444839012861130199261335406468531598672743
веществ2222839012866128236297360421487
и2745839012875
др.2854839012871142177
5.10.10231326012670106176245281
Определение133813260126110190268330401464541604685765827
активности22001326012670151220301377458527589658739
сукцинатдегидрогеназы(СукДГ-зы)29741326012663132213294374455524594665726790871941101910901153121612971365142215321578167917481829192520142061211822272274
в52831326012676
лизате12871567012679160216286354417
митохондрий17391567012696177244315385454536606684765845
с26201567012662
использованиемферроцианида271715670126811422232933724475035726497198008809421037113411961274135214221503158416531735181518861956
калия47081567012681150228309384
Принцип120518050128101171242312381450521
определения17611805012874143213276347409470532601671736
активности25321805012873139241311372442511574675743
СукДГ-зы33141805012894156222311390439494589
основан39381805012872135210280346409483
на44561805012878141
использовании46341805012875138213282353416471542608670745820894
в8512046012866
качестве9522046012894157227290352414480541
конечного15282046012894163239300371445516573643
акцептора22062046012889156231294368429498569631
электроновферрицианид287220460128861562182863474164875626316987898519209911065114012151278135214271498
калия.44052046012893156226301365401
Последний484120460128127195258328390460536610685
под8512287012875146216
действием13892287012871134208271332398472535624
СукДГ-зы23332287012894164230326407456512606
восстанавливаетсясукцинатом32602287012866136199261323385459522588658732799861922984104611101173124313101385146015351597165917281817
из53972287012875131
соединенияжелтого8512529012862133195266341416478552628692789851921982105111091179
цвета20662529012883150212273336
до24372529012880149
бесцветного26222529012883145207282349411472546615673742
ферроцианида34092529012891153223293363437513575649725795858
калия43042529012878140210284349
(К4468825290128561504838258408245
[Fe(CN)6488325290128471251872343284294755357258408245
]).5402252901284792127
Активность85127710128101169230306372447517579641705
фермента159027710128205267336426488562623686
пропорциональна231127710128188258328403473543618692763837900970103211091172
количеству351827710128182252323396467529592653719789
восстановленного434027710128180251313375437499573644710780842916991106111191188
феррицианида.8513012012891153224294369444518581656730801864899
Реакция17843012012878141203271345421486
протекает23033012012876145216277340407469531593
по29293012012876146
следующей31113012012862132192266337440547610685
схеме:38313012012863133195284345384
Сукцинат12053254012894164230305381456519580
+18213254012879
2[Fe(CN)6193332540128701171952583053985005452479330908245
]3-СукДГ-за2524325401284725703224082457626453254012894164230326407455510572
Фумарат325232540128111181268330401463525
+2[Fe(CN)6381232540128791491962743363824765776234436330908245
]4-44823254012847452732240824576
+46383254012879
2Н+475232540128701714922322408251
.4973330908222
Реактивы:1205349501288614821828438545651661118163495012839
1.12053737012870106
0,115593737012870106176
М177037370128125
фосфатный19303737012891160223312375436510605679
буферныйр-р,26453737012871141231293363438533607677725796831
(рН35113737012846116217
7,8).37633737012870105174221255
2.12053979012870106
0,115593979012870106176
М177039790128125
р-р19283979012871118188
янтарной21513979012865140201263333407478552
кислоты(рН27373979012868144206276345407501548617719
7,8).34913979012870105174221256
3.12054220012870106
2515594220012870141
мМ17354220012889212
р-р19834220012870117186
К3220542200128942299427508245
[Fe(CN)6234342200128471251872343284294742817427508245
];2862422001284785
4.12054461012870106
15015594461012870141210
мМ180544610128143268
р-р210844610128123171240
азида238444610128116171246317380
натрия279844610128128191252322398462
(необходимо329544610128100176238307379449518590665753823
соблюдать415444610128115186256327431502565627691
все487944610128120182245
меры515744610128143205275370
предосторожности,8514702012875146208279348411472541612682779853923985104711221157
принятые20424702012875145220295359420515576
при26534702012876145220
работе29074702012870133205274336397
с33394702012862
ядами);34364702012865136199288362409447
5.12054945012870106
2515594945012870141
мМ17354945012889212
р-р19834945012870117186
ЭДТА,22054945012893188274375409
рН26494945012870171
7,8;28554945012870105175214
6.12055186012870106
2015595186012870141
%173551860128117
р-р18875186012870116187
ТХУ.21095186012886186285321
В12055427012894
работе13345427012892155225296358419
используется17885427012897160234303374438493563623686748812
либо26365427012892167238308
10%29805427012891162279
гомогенат32945427012879149238307364426501564625
тканив39545427012884152214289363430
0,144195427012892128196
М467354270128125
фосфатном483254270128113183246336398460535605694
буфере8515669012871142231294364427
или131356690128102173247
в15965669012894
среде17255669012889160221293355
выделениямитохондрий,2115566901289318825932239245452860366775683189396210311102117712481318139314681503
либо36535669012897172244313
суспензия40025669012889159220295358433488563627
митохондрий.466556690128116191252321391462536608677752827862
Разведение8515911012878140196262324395458532608669
подбирается15555911012875145216287363432495556618680745
в23355911012866
предварительном243559110128751452082793464074775516136757468098829531042
эксперименте.35125911012861128190265327396471560623696758820855
Дляэтого12056152012896166230291352422480549
необходимо17896152012888151220291362431503578666736
выделить25606152012879174244307377452514578
митохондрии.317261520128102177238308378448523594664739814849
Накануне406961520128101163231293368439513575
готовят46796152012871141203273340403464
среду51786152012875145208279349
для8516393012871142206
выделения109263930128122216286349419481557631696
с182363930128117
рН197563930128124226
7,4223563930128125161231
следующего250163930128117188250320390493601664721791
состава:332863930128117187249310373439501540
0,225390363930128124160230299369
М430863930128178
р-р452163930128125176245
маннитола,480163930128144206281356431493561632694729
0,075Мр-р8516635012870106176245316440510557627
сахарозы,151366350128130192261324393464520613648
0,1мМр-р219666350128137172243332456526574643
ЭДТА,287566350128159255340441476
а338666350128129
также355066350128128190259356419
среду400466350128129199262334404
для444266350128138208272
разрушения475066350128137200255325395502564640715779
митохондрий8516877012889164225296366435510581651726801
–168768770128165
0,33%188868770128166201271341459
р-р238168770128165213282
дезоксихолата.269868770128167229284355422484559629700770832894955990
инкубационная3723687701281702453133834535165916657368108869491012
среда477068770128158227290360423
для522868770128166237300
проведения8517118012875146215282344414477552627691
ферментативной15787118012818524831740646854260466672880386994310131088
реакции,270171180128165227290358432507581617
содержащая335371180128157227298361430528590698759824
в421271180128162
объеме440871180128166237310372461522
2,9496571180128166202270
мл527171180128184254
следующие8517360012862132195266336440547623685
компоненты15717360012882153242316386461523598659754
(в23607360012861127
мкмолях):калий252273600128103171259329400464533580618687748818893968
фосфатный352673600128105174237327389450525619695
буфер,42567360012884155244306377412
рН47037360012883185
7,449227360012885120190
–51477360012888
300,52707360012885154225261
α-кетоглутарат8517601012874120188251312382440510580640702772835896
–178276010128134
6,195276010128133169
НАД215676010128165266361
–1,255376010128134204240
коэнзим282876010128131201262336392465555
А341876010128165
–361876010128134
0,45,378876010128134169239309344
дитиотриэтол416776010128136210272346416478547622683744813883
–508576010128135
1,5,525676010128134169239274