276
11931067818011156112167
Подготовка12055960128101171242297366468538599664734
исследуемого1974596012892154217278340411472535624694749818
материала.28285960128111181283345414483554616685720
10%3607596012870141258
омогенаты3900596012891180249307371445507569662
тканей4597596012883151213287350425
готовят5057596012879148210280347411473
на851839012875138
холоде10248390128122192263332403466
на15258390128128190
фосфатном17508390128144213276365428489564634723
буферном25088390128124195284346416491562650
р-ре,31938390128123172243304340
рН35688390128122224
7,4.38268390128123158229264
Для41258390128148218283
дополнительного4441839012812419527034041048555962168375381789296110181087
разрушения8511080012870133188259329436498573647712
митохондрий159810800128181257318387458527603674743819893
гомогенаты252710800128149219309378436498572635696789
замораживают335110800128148210299369439501598672739801906967
и435310800128167
оттаивают.455510800128162224286348422488551655716751
В534110800128185
зависимости8511321012855118184259321396485555618679753
от163913210128196258
взятого193213210128190246310371441499569
количества253613210128194264335408479541604664730792
ткани336313210128187256318393468
гомогенаты386613210128183253343412470532606668729823
готовят472413210128184254316385451516581
в534013210128191
соответствующих85115630128621332022643303924535165776437138169249991069
разведениях.19561563012870132187254316387450524599663733769
Для12051805012896166230
анализа14701805012880155218288363419481
используют19861805012893155229299369434489559663724
гомогенат27451805012875146235305363426501562624
или34041805012892163237
супернатант,36761805012880151224287357433495557618693755790
полученный45011805012892162232302372434510584679753
при52901805012892163237
центрифугировании8512046012875138213275343418509579635711781851918980105511291204
гомогената20902046012857128217287344407482543604667
на27922046012875137
холоде29632046012870140210280351416
при34132046012876145221
70036672046012871140211
g39122046012870
в40182046012866
течение41182046012862124194257331405468
1046212046012870140
мин.47962046012889164238273
Ход12052287012886155227
определения.14672287012889159229292363425485547617686752787
В23082287012894
центрифужные24372287012894156231293362438528598694769864927
пробирки33992287012894163233305379448517592
для40272287012889159224
инкубации42862287012894168237307377439513589663
вносят49872287012885160230292357418
154402287012888
мл8512529012889159
натрия10442529012896158219290365429
пировинограднокислого,15082529012896171240311378451527596656726788859934100410721147120912791349140714761512
по30552529012894165
0,532552529012890125195
мл348525290128110180
р-ров36992529012890139209280347
АТФ,408125290128121207317352
MgCl24487252901281251952893294815258408245
,48612529012835
Na24931252901281211835114258408245
CO3516025290128941955354258408245
и54352529012895
1,58512771012870106176
мл106227710128122192
буферного128927710128105175264327397473542600669
р-ра.199427710128103152222284319
Ставят234827710128127188250317381443
в28262771012899
термостат29602771012894157227316386449510573634
с36292771012895
регулируемой376027710128103166223294362437507578638727797873
температурой46682771012895157246320382451514575646714785859
(30оС)8513012012847117188103829830824510843012012894140
и12603012012875
строго13713012012863124193263321391
через17983012012871133202265319
определенные21533012012870146216278350412482545618693787850
промежутки30393012012875145214302365462532592660735
времени,38103012012867137199288350425500535
например,43813012012875137212282357446508577613
через50293012012871133203265321
1053853012012871140
сек,8513254012862125193228
добавляют11143254012876145216279345415479584646
по17953254012879148
119793254012873
мл20913254012889159
источника22843254012880143204273344418493562623
фермента29473254012891153222312373448510572
(гомогената35543254012851109178267336394456530593654716
или43063254012878148222
супернатанта)45633254012867137210273343418480542604678739802848
и54473254012878
преинкубируют8513495012875146208282357425495565641711782885946
1018323495012876146
мин.20183495012889164239275
После233334950128102170233303365
этого27333495012866127197254324
добавляют30933495012875148219282348418482587648
0,537763495012876111180
мл39973495012889159
р-ра41913495012874122193254
ФМС448534950128111235329
и48493495012881
149653495012874
мл50813495012888159
р-ра52743495012876125194256
тетразолия8513737012861124185255318373442513587652
нитросинего153837370128103177239308378441515590652710780
в23543737012893
указанной24823737012899165227283345420496566641
последовательности3158373701281021722353053674375085746376987598298939671038109911611236
и442937370128101
через45663737012898160230293349
такие49503737012888150219293355
же534037370128124187
промежутки8513979012875146215305367463533592661736
времени,16223979012867136199288350424499534
как21913979012868130198
и24243979012876
источник25343979012875137199268339413488557
фермента.31243979012891153223312375449510572608
Время12054220012894164227315379
инкубации161942200128105180248318388450526601676
зависит23304220012885147214288351426488
от28534220012898160
активности30484220012892160221295362437506569629704
фермента378842200128120183253342404479541602
и442542200128105
колеблется45654220012898168239299371441503564627691
для529142200128100171235
печени8514461012875138208271345420
и13074461012884
кишечника14264461012879154263325394470544613674
от21354461012881142
3023134461012880151
до24994461012881151
6026864461012879150
мин287144610128100173249
и31554461012886
длиннейшей32754461012882152232307381444519627689764
мышцы407444610128100193301375469
спины45784461012873148222298391
–50054461012882
до51234461012882151
12053104461012881150220
мин.8514702012889164239275
Реакцию116147020128250312375443517592697
останавливают18924702012824330636742950356663270277784390610101071
погружением299847020128249319377447518613675750825888977
в401047020128238
ледяную428447020128242304375440514585688
баню.500647020128244307382487522
Образовавшийся851494501281011722433063614304975596257338078829451008
осадок18944945012873135197268338406
формазана23384945012891161231320382438499574637
отделяют30104945012872134204265335400505565
центрифугированием361249450128761382132753444195105806367117828519189801055112911921281
на49304945012875137
холоду51024945012872143213282354424
при8515186012875146220
1500110751860128110180250320
g146251860128111
в160851860128107
течение175051860128102164235297372448510
15229551860128111181
мин.251151860128129205279314
Надосадочную286051860128142203275346407468540610681756827930
жидкость382451860128138213285353423485547611
сливают,446851860128103173248314377481542577
осадок508051860128110173236307377445
формазана8515427012891161231320383438500574637
растворяют15235427012881142205266332403472537641702
в22605427012876
1023725427012880150
мл25585427012899169
ацетона27625427012873148210272342418481
и32785427012884
через33975427012881144214276332
137635427012881
час38795427012881144206
снова41205427012873147218284345
центрифугируют450054270128861492242853544295205906467217928639661027
при8515669012875146220
прежнем11085669012876145208305379442531
режиме.16745669012872134231305394455490
Интенсивность220156690128101176237300375437513579653722785846910
окраски31465669012872141210273335403478
определяют36595669012872147217279350413483546651713
колориметрически4407566901286914021028035042551457563770778185291597610441118
при8515911012875146220
длине11075911012871141215290353
волны14955911012866135205280373
57019045911012870139209
нм21495911012875164
против23465911012875146215277351418
контрольной27995911012867138212274344414483547621692767
пробы36005911012875146215286381
или40155911012875145220
против42705911012876145214276351418
воды.47235911012866134206300335
Биологическое12056152012883153223284354409479545608670735805868
значение.210861520128170240309375438507577640675
ПирДГК293561520128101176246342423517
катализирует348761520128184246307370440515570644715785846907
промежуточную4429615201281912623314204825796497097798509259961099
реакции8516393012870133195264338412488
аэробного13746393012898158228298369444514572641
гликолиза20496393012893163238307377447522580642
–272663930128105
превращения286663930128111182244311379442550613687762826
пировиноградной37276393012811118625632539246754161267073980287294810171093
кислоты485563930128104178241311381442535
в542663930128102
СО285166350128941951045669008245
и11516635012875
активную126166350128107175236311378452522625
форму192166350128136206277367437
уксусной239166350128116182244316376451522598
кислоты,302366350128113189250319389451545580
окисляемую363866350128114183257320390455517606676779
в445266350128111
дальнейшем459866350128116179249313388450524633695783
в541666350128111
реакциях8516877012870133195264338412477546
цикла143368770128105180247318380
трикарбоновых18486877012891161235304366435507577651722788881952
кислот.28356877012898172235305374437472
В334268770128123
состав35006877012892162225286349415
его39506877012892149219
входят42056877012896165234306370432
346726877012899
энзима48076877012890165220294383446
и528868770128104
554286877012898
коферментов:8517118012868138230291362451512587649718784824
НАД,171971180128102203298333
ФАД,209571180128111212307342
ТДФ,24727118012895190301336
HS-KoA285371180128101179225327396500
и33877118012885
липоевая35077118012879154229300362428490555
кислота,40977118012877152214284354415477512
составляющих46447118012871142205266328394465528633741815884
ПирДГК.85173600128101176246343423517552
Он143973600128101176
активируется,16497360012863132193267334409478549609670733797832
когда25177360012869139197267330
в28827360012867
митохондриях29847360012888164225294364434509580650725790859
снижается38787360012863137213309372434495558621
выработка45337360012867162232294366435497565627
АТФ.519573600128101186297331
В8517601012894
эти98076010128113175250
органоиды126576010128124194251314388457533604698
усиливается199976010128122183258328403470532594656718783
поступление281776010128128198261322392465538600675750812
ацетил-КоА366476010128116190253314389459507599669771
с446876010128116
последующим461976010128129200261331394465535639746822910