205
10731067818011156112167
1.1205596012870106
0,31345596012870106176
М15555960128125
Трис-НСL-буферный17155960128861552312923404415346206667378078969591029110511981274
р-р3023596012870118187
(рН3246596012846117218
7,6).3498596012871106175222257
2.1205839012870106
0,0051345839012870106176246315
М16968390128125
р-р1855839012870117187
НАД-Н.20788390128101202297344444479
3.12051080012870106
Глицерол-3-фосфатДГ1345108001288115222630136343350357462169073782889896010501112117312691350
(0,327301080012847116152222
Е29871080012886
на31071080012875138
кювету).32781080012869174240302362432477512
4.12051321012870106
Триозофосфатдегидрогеназа1345132101288615623130135742551758664974080286393499710541128120012691339139714591535159616521714
(0,330941321012847117152221
Е33511321012885
на34711321012875137
кювету).36421321012868173239301363433478513
5.12051563012870106
Альдолаза134515630128102171235306376447509564627
(0,320071563012846115151221
Е22631563012886
на23821563012875137
кювету).25551563012868173238301362432477512
Ход12051805012886155227
работы.14661805012871140211281382477512
Термостатиремую120520460128861482183073774395005636246997698319209901093
при30652046012875146220
250С40512046012870141419220160824542382046012894
кювету50972046012868173239301363433
спектрофотометрофотометразаполняют851228701286213720026833039946956062969176184991297310431113120412731335140514931556161716871749180418671942201120822156222023252387
последовательно356722870128751462082783414114805476096727358058689421012
буферным49092287012871142231294364440533621
раствором,8512529012870133195257323392462532622657
НАД-Н,экстрактом15432529012810220229834544648154160967173380386693399410641154
ткани27322529012862129191266341
и31092529012875
бидистиллированной321925290128721472182933554164925626327067768459129741050112411931268
водой45222529012867137208279353
до49102529012873142
общего50882529012871141250312370439
объѐма38512771012870142215277366427497
мл,138427710128195265300
перемешивают1719277101281812423133744635266347097758389431003
и,275727710128180216
спустя300827710128168243313373435499
3354227710128177
мин,375527710128195270345381
снимают417127710128168242317406468573634
измеряют484027710128185241329390460525629691
значениеЕ1.8513012012855131193264326400476537623147430680824568
Дальнейший15423012012896157227291365428502609685760
ход23373012012885155226
определения25983012012885160229292363425495558633707772
зависит34053012012871133199273335410472
от39113012012885147
качества40923012012883146216278340400466528
используемых46563012012890152226297367431486556616705800870
ферментов.8513254012891153224313374449511580647682
Обязательным156732540128162233298354416477538608672747841930
условием253332540128130191261331397473535624
определения319232540128130205275338408471544605681755820
является404732540128124191261325387447510574
отсутствие465632540128132193256326385448509575650713
в540432540128126
препаратах8513495012875146208282345414477538600669
ферментов155634950128112174244333395469530600667
более22583495012892163233295356
чем26493495012892155243
0,05%примеси29283495012891127195266382457527602691753816890
лактатдегидрогеназы.38533495012891153221283345406478540596671743813882940100210761139119512891324
Если521234950128107169239314
глицерол-3-фосфат8513737012858128202278340409479550596667714804874936102710901151
дегидрогеназа203637370128204267325400471540611668730805867922985
(называемая305637370128179254316372466533594656745807872
также396337370128194255323421482
глицерофосфат4480373701281902613354114735426127037738359269881051
дегидрогеназой)8513979012871134192266338407477535597672734789860934981
не18683979012880142
содержит20453979012867137208271341437513575
примеси26533979012881150226314376439513
альдолазы,32013979012868137201272342413475530625660
то38963979012867135
целесообразно40673979012882144214277339408477549619682737811881
провести49833979012880150221287348411472546
раздельное8514220012870133188260321391455530600662
определение15484220012870145215277348411481542617693754
триозофосфатов23374220012862133207278333402494563626715778839909975
(ДОАФ)33474220012847143244346456502
и38844220012875
Фр-1,6-ДФ.399442200128111181228298334403451545656691
В12054461012894
этом13344461012889151221310
случае16794461012892162232301363425
в21404461012896
кювету22714461012897203269332393463
добавляют276944610128101172244307373443507612673
0,0234774461012898133203273
мл378644610128119189
Глицерол-3-фосфатДГ40094461012811118125633039346253360365272176885892899110811143120513001381
и542544610128105
0,028514702012870106176245
мл11324702012898168
триозофосфатизомеразы,1335470201287113921528434041050157063372478584792297810481136119812691330138614801515
перемешивают28854702012883146215278367428536611678740845905
содержимое38264702012872141212275345442517605674737
еѐ45984702012871134
и,47664702012884119
спустя49204702012872146216277338403
653584702012879
-54734702012858
108514945012870141
мин,102649450128103178253288
с13494945012876
трѐхминутным14604945012876145208277366440515586645721815905
итервалом23984945012889151213282349411481550639
измеряют30724945012891147234297367432537598
значение37064945012869142205276337412487549
Е2.429149450128100439050000824567
После448749450128101171234304366
окончания48884945012883151221296367428504578642
реакции8515186012870133195264338412488
добавляют13725186012872143213276342413476581643
альдолазу20505186012860130194265335406468523593
и26775186012875
также27875186012861124192289351
дважды31735186012872137200297368462
измеряют36715186012876131220283351416521583
значениеЕ3.42895186012854128190260323398473535622491052410824567
Очевидно,120554270128101171234300375447521591626
что18665427012889151221
содержание21225427012881151222285354451513588663725
фосфотриоз288254270128109179241332402463532608677733
(ДОАФ)36495427012865161262364474520
можно420454270128108178276350419
рассчитать46595427012892154215278348423485546608672
по53655427012894164
разности8515669012870133188264333396457531
ΔЕ11418566901281041901607563908245
=16835669012879
(Е1179756690128611471942572408245
-Е2201856690128471312149572408245
),222456690128472271572408222
а23225669012862
содержаниеФр-1,6-ДФ24195669012877147218281350447509584658721832900948101910541123117012651376
-38305669012861
по39265669012889159
разности41215669012883146202277346408469544
ΔЕ2=470156690128105190489156390824549375669012879
(Е2505156690128611475197572408245
-Е3527156690128471335403572408245
).547157240823759
Если8515911012886148218293
препарат117959110128151222285359421490553615
глицерол-3-фосфатДГ182959110128135205278354416485555625672742790880950101211031165122713211402
содержит326659110128139209281344413510584646
примесь394759110128151221296385447509572
альдолазы,455459110128138209273343414484546602696731
то532059110128138208
рекомендуется8516152012870133201270360422496568638699760822887
определять17736152012870145214277347410480545606670
суммутриозофосфатов24786152012862132219308379438509584655713781872942100510951157121912881354
и38676152012875
Фр-1,6-ДФ.397861520128110180227296332402448543654689
Внесение12056393012894169231294356430505567
ферментов180763930128225288358447509584645715781
может262363930128223293391453514
изменить317263930128210265354415489564626690
оптическую389763930128204278340415486547610678748851
плотность478363930128209279349411486556618680744
растворов.Для8516635012870133195257323392462532599634729799864
внесения175066350128167240303364427502576641
соответствующих242666350128164233304365432494555616677744814918102511011171
поправок363366350128174244319389451518588655
после432366350128176246309379442
окончания480066350128169237307382452514588664728
измерения8516877012875131220282351414489563628
(которые15146877012899166237299367437532593
проводятся214368770128127198267334403475538600664729
против290768770128126196267328402469
кюветы341168770128120225291353414509
с395568770128114
водой)410468770128118188259329403450
рекомендуется458968770128123185253322411474548619690750812874939
провести8517118012875146215282344407468542
контрольные142871180128119188264326394464535598673767830
измерения,229271180128126182271333402465539614678713
т.е.304071180128113148210244
слепой331971180128113183245320391465
опыт,382071180128120195289351386
в424171180128117
кювете439371180128118223289351412475
со490371180128113182
всеми512171180128117179242331404
компонентами,8517360012868138228302372447509583645707796870905
исключая17917360012875138206276379450512576
исследуемый24037360012875137199269331403473534622717792
экстракт.32307360012861127190251321384451513548