﻿196
10531067818011156112167
1)1205596012870117
Гл-6-Ф+НАДФ1357596012882152198267315426504606707802913
Глюкозо-6-ФосфатДГ23045660825191153195240276321352397427500544585648693758814866
6-фосфоглюконат320659601287011620727633942949955762873280086994510061068
НАДФ-Н+Н+;430959601281012012974084555566357365045566082515095596012839
2)1205839012870117
Фр-6-Ф13578390128111181228297345456
ФосфогексоизомеразаГл-6-Ф.1847809082721171582212663013413834234675135495926506907357808168592708839012881152198267314425460
Реакция12051080012878140203271346421486
(1)172610800128163232279
практически204010800128191261323392452527598660723790865
необратимая,294110800128191252323393463526587662750813877912
а388810800128178
равновесие410210800128186249315390459526588650724786
реакции492310800128189252314383457532607
(2)сдвинуто8511321012847117164227297364439513583643713
в15991321012895
сторону17291321012891152222293362438508
образования22711321012898170240302358428494557631705770
Гл-6-Ф.307613210128110179228298346457491
Если360213210128114176246321
реакции39581321012899162224292367441515
(2)45091321012875145192
сочетается47371321012890159230293354415478539601666
с54381321012891
реакцией8511563012870133195264338412475550
окисления14361563012891159234296366429504578643
Гл-6-Ф,211315630128102172220290338449483
фруктозо-6-фосфат263115630128112183253320381451507577625694742833902965105611171178
полностью38441563012897167238311381443505569673
окисляется45521563012891160235298368432495556617682
в52691563012887
6фосфоглюконат.539115630128928511805012891161224314384443513617685754829891953988
Для12052046012896166230
определения14702046012885160230292363425496558631707771
суммы22762046012876147235324418
ГекМФ27292046012896158225350461
можно322520460128103173269344414
использовать36742046012889151226296366430485555621684745809
препараты45182046012889158221296358428491552645
Гл-6Ф5199204601289516521528485122870128111
ДГ,99622870128169250286
содержащие131722870128135205277340409506567676751812
примесь216422870128148219294383445507571
фосфогексоизомеразы.2770228701281642342963874585165776457087788539099781067112911981261131614111446
При425122870128174244318
небходимости460522870128147210281351421493567656725788849923
раздельного8512529012870133188260321391455530600658728
определения161425290128100176245308378441510572647723788
требуется24372529012892161224294365425486549613
Гл-6-Ф308625290128112182229299347458
ДГвысокой357825290128127207273368430499568637712
степени43252529012893154216291353427503
чистоты486325290128102176238300369430525
и542325290128105
отдельный8512771012870132203265335399473568642
препарат15292771012875144207281343412475537
фосфогексоизомеразы.20992771012891162224314384443504572634704779835904993105611241187124213361371
Определения120530150126101179249312381444516578655733805
суммы20453015012662125221317413
ГекМФ.2492301501268514822034446429553012012835
Реактивы.12053253012886148218284385456516611646
1.12053495012870106
0,213453495012870106176
М155534950128125
Трис-НСL-буферный171534950128861552312933404415346206667378078969591029110511981274
р-р30233495012870118187
(рН32463495012846117218
7,5-7,8).34983495012871106175223293328397444479
2.12053737012870106
0,0513453737012870106176246
М162637370128125
Р-р17853737012878126195
MgSO42015373701281251942733742389379308245
.24333737012835
3.12053979012870106
0,00513453979012870106176246315
М169639790128125
р-р18553979012871117187
НАДФ.207839790128101202297407441
4.12054220012870106
Гл-6-Ф13454220012881152198269315426
ДГ18054220012896177
с20174220012863
примесью21134220012875146220310371433497602
фосфогексоизомеразы.27494220012891161224314384442504572634704779835904993105511241187124213371372
Ход12054461012886155227
работы.1466446101287114021128138247719434461012835
В12054702012894
термостатируемую1334470201288514721730637543849956262369776783889898710581162
при25314702012898169243
250С28104702012893163297546720824530214702012894
кювету31504702012890195261323385455
спектрофотометра3639470201288616122429235442349258465371578587493599610671128
вносят48024702012890165236299362423
0,7552614702012893129197267
мл8514945012889159
Трис-НСL-буферного104449450128128197273336383484577663709781851941100310731149121812761346
р-ра,242549450128112160229292327
0,3278749450128112147217
мл304049450128130200
р-ра327449450128111160230293
MgSO43602494501281672363144154017500008245
и41194945012875
0,3422949450128112148218
мл448149450128131201
р-ра471649450128112160231293
НАДФ,504549450128142243338449485
доводят8515186012871142209278348413475
инкубационную1361518601281852603283994685316066817508269009711074
смесь246951860128173261324386450
бидистиллированной295451860128181257329404469530604675744819888959102610871162123613071381
водойдо437051860128176246317388463534604
3501051860128179
мл,522451860128199269306
перемешивают8515427012875138208270359421529603669732837897
и17835427012878
при18975427012878148222
34021555427012873144213
нм24045427012878167
измеряют26065427012880135224287355420525587
значениеЕ1.32285427012858133195266329403478540626385454820824568
Вносят39615427012894169238301364426
0,0344225427012873109179248
мл47095427012889159
взвеси49035427012869125190253315390
Гл6-Ф533254270128811518515669012870118229
ДГ111456690128176256
с140556690128143
примесью158356690128155224300388451512576681
фосфогексоизомеразы,2298566901281712413043954645225856527147838599149831073113512041267132214161452
перемешивают378556690128156219288350439502610684750812917978
и479856690128156
дважды498956690128151217280377447541
измеряют8515911012875131220282351416521582
значение14685911012891166228298360435510573
второй207659110128102163233303373448
Е22560591101281212680596608245
с27765911012862
интервалом287359110128111186247310380445508578647737
3364559110128105
мин.378759110128124198273308
Как413059110128129191260
правило,442559110128109180243309383453523558
реакция501859110128106169231299374448512
заканчивается8516152012855118186248323393469535598660721782847
в17336152012895
первые186361520128103166235301396458
323566152012898
мин.248961520128118193268304
С282861520128121
установлением29856152012898159220283358429496566627701777838927
постоянного394761520128104173236297368432509584654712781
Е24763615201281144878620708245
в49686152012866
кювету50696152012897202268330391461
повторно8516393012875146212274342413487557
добавляют14436393012876146217279346416480584644
0,03мл21226393012875110181250339409
взвеси25666393012870126192254316390
фермента29966393012891153222311373448510572
и36036393012878
измеряют37176393012882138227288358422527588
значениетретьей43406393012860135197268330404480541604674736797861923998
Е3,53786393012886546364490824567
необходимой8516635012875138208279349419490565654724799
для16856635012885156220
поправки19406635012891160236305368434503576
на25526635012890152
изменение27396635012890146235295371433507582644
оптической34186635012886160222296367429491559629704
потности,41576635012890160221295365427489564599
вызываемое47916635012882175230325391453514603672735
внесением8516877012866141204266328403478541628
фермента.151568770128196258327416479553613676711
Сумму226168770128198268355444515
ГекМФ281168770128186249317442552
(поскольку339768770128152227298361429498569632700770
фермент420168770128196258328418480554616
содержит485268770128167238308371440538612673
фосфогексоизомеразу)8517118012891161224314384443504572634704779835904993105511241187124113121357
рассчитывают22437118012870133196258329404466560626689794855
из31317118012875131
величины32957118012867128199274344419494589
ΔЕ39197118012890176
Гл-6-Ф.41297118012881151199268316425460
ГкМФ=12057360012881150274385465
(Е2170573600128461321836741508245
-18827360012847
Е1)19647360012885204874150824576
–21587360012870
(Е3226473600128461322394741508245
-24637360012847
Е2254573600128852630741508245
).2675736001284782