221
7631347818011156112
Примечание:Наборможноиспользовать1205596012810117124233139346053060066973119375960128391412032733424135015726697438148889511025109511661229128413531420148215441608
в3824596012866
течениеодногогодапри4168596012861124194257331406468538609684754812881939100910801143121812871362
условии851839012870131201271337412487
хранения13748390128120189252326389463538603
его20128390128110168238
при22858390128123193268
температуре25898390128110171260335397467530591662730793
-20°C.Избегатьповторных3417839012896165235291385420521576648710767829891954102910991165122712961366144215351605
циклов50588390128123198267337405472
замораживания-оттаивания.851108001285511820727734640950658064770978485892397110401102116312251299136514281503157716421677
3.11.11431567012670106176245281
Анализактивностиядерногофактора150315670126101182251331412468538619687768843924994105711241206128013511413149115721642170617761873194220242091216222402309
транскрипцииNF-kBс38461567012669147217298360441519599680760841921102411101156123513291391
использованием126318100126811432242943734475045736497187998809421037
моноклональных2336181001269516424531539747554462669477384892910401108
антител34801810012670151219300369431509
производства40241810012681159229310366442511582645712789857
Beckman49171810012693156218296412480559
Принцип.12052046012810117124231238145052117272046012835
Запись18842046012870132207282344408
изображения232820460128162218288359429491588650725800864
клеток322620460128156226288349418487
выполняют374820460128153248322392463536601708769
с455220460128150
40-кратным473720460128157228276343413476537611705794
увеличением8512287012870135197267341412475550625688777
при166322870128101171246
низкой194522870128101175231299369444
скорости24242287012888157226296366429490564
потока302322870128101172234303371434
с34922287012888
использованием361522870128101164238309379443498568634695770845906995
программного464522870128102172242300369431520609683754811880
обеспечения8512529012870142204266341403474536610686750
INSPIRE®.163625290128130231309387434526612718753
Для242425290128179249314
анализа277325290128146221283353428483544
полученных335225290128159229300370439501576651745815
данных420225290128154217291366460530
применяют476825290128158227303392453528593702763
программное8512771012875146215273342405494583657727789
обеспечение167527710128160231293356430492563625700775837
IDEAS®.254727710128136237323423501608643
Степень322527710128183244307382444519584
транслокации384327710128151220283358420490560627690765839915
NF-κB479327710128191269319390483
из531127710128164219
цитоплазмы8513012012875151212281356427489544633726
в161230120128150
ядро179730120128148219288359
определяют219130120128153228298361431494564628736796
с302230120128146
помощью320230120128159230319388496560665
коэффициента390130120128152221282373464538613688750826887948
Similarity488430120128162201311347387450496534574644
(Подобие),8513254012847148218290359431505568615650
который15363254012868137199269339432508
подсчитывается20793254012875145216279350424486578645707770831893958
в30723254012866
программе31733254012875144215273342405492581644
IDEAS®38523254012846148233334411518
для44053254012871141206
каждой46463254012868131228298368443
клетки51243254012869139200262330404
и8513495012875
отражает9613495012871132201264361422485546
степень15423495012862124186260323398462
колокализации20373495012869139209279347409479554610672746821896
NF-kB296934950128102179226295388
и33923495012875
7-AAD.35023495012871118219320421455
Приготовление120537370128101171242296366468536598659721792861924
тканевого216337370128143208277348410471540595665
экстракта.Замороженную28633737012810316923033140147153763870874336073737012870133222292362431529591665741811914
ткань455637370128101170232307372
(10049623737012887158228298
мг)529537370128130187234
гомогенизируют8513979012858128217286344406480556612685756827930991
в187739790128154
жидком206739790128184259331399469559
азоте,266139790128149205273335397433
затем312939790128141203264327416
ресуспендируют35803979012815822128335341448955262769877284391310171078
в469339790128154
500488239790128157228298
мкл521639790128176244314
фосфатного8514220012891161224314376438513583641710
буфера,159642200128114185274337407470504
содержащего213542200128106176248310380476539647709767836
0,137300642200128113149219289359
M340142200128167
NaCl;360342200128146207301339378
0,0027401742200128113149219288358428
M448042200128169
KCl;468442200128145238277316
0,01503542200128114150218288
M535942200128167
Na2851446101281011631014451608245
HPO4;106044610128101179280350389
0,001714854461012883118187257327397
M193044610128125
KH22102446101281012022304451608245
PO423504461012878179249
(pH26354461012859129231
7,4),29014461012883118188235270
и32064461012888
центрифугируют333044610128881502252873564305225926487237948669691030
в43954461012881
течение45114461012874136207269344420483
550294461012882
минут514644610128102177252323382
при8514702012875146220
300011074702012870139209280
g14214702012870
и15264702012875
4оС.16364702012870170746720824517524702012894129
Надосадочную120549450128101163235305368429501570641715786889
фракцию212949450128190260323391466541646
сливают,281049450128161231307373435542602637
а348349450128161
полученный367949450128174245315385454516591667760836
осадок455049450128170231293364434502
вновь508749450128166241310377441
ресуспендируют8515186012870133195265326401464539610685755826929990
в18765186012871
5019825186012875145
мкл21675186012889157227
буфера,24295186012876146235298368431466
содержащего29305186012867136208269339436498606669726795
0,13737615186012875110179249319
M412051860128125
NaCl;428451860128101163256295334
0,002746545186012873109179248318389
M508251860128125
KCl’524751860128101194232279
0,018515427012870106176245
M113254270128184
Na21350542701281612231573548208245
HPO4;161954270128101179280350388
0,0017204254270128130165235305374445
M252154270128185
KH22741542701281612623003548208245
PO430495427012878179248
(pH333154270128107176277
7.4),364454270128130165234281316
а399554270128122
также415054270128121183251347410
ингибиторный459554270128135209267341413487549617688763857932
коктейль,8515679012868138207269330405475539574
включающий14605679012873141211315385448553659734809
в23055679012873
себя24135679012869132202267
0,127155679012876111182
мМ29395679012889212
AEBSF;319356790128101187280358436475
10–210–2370356790128771472202893992567901283540285679012870140209280
мМ43505679012888213
Bestatin;46055679012894156211249312350389459498
0,20,5513956790128761111815321567901283553555679012870106174
10–28515937012870141211280
мМ10–21167593701281062311398593701283514335937012870140211280
мМ174959370128106231
E-64;201559370128103150220291330
0,1Leupeptin238059370128881231942573593701283526095937012886148217287349419458497567
Hemisulfate;321159370128118180290327382453491538601638701740
0,1539875937012887123192261
10–242845937012888158231301
Aptrotinin,462159370128119188227274343383421492530600635
при52915937012893163238
постоянном8516194012875146208270339404478552623712
помешивании15976194012896166255317425499566628703777853
инкубируют24846194012896171239310379455524597701761
15Pepstatin328261940128911613444619401283534806194012878139209263302365404442512
A;402761940128123161
0,0842246194012890125196265
минут452561940128110183259329389
при49496194012896167241
4оСи52266194012892531861640824553636194012894168
центрифугируют85164410128751382132753434185095796357117818539561017
10190364410128112182
минут212164410128130205280350410
при256664410128116187262
14000286464410128111181252321391
g329064410128112
и343864410128116
4оС.359064410128113370464110824537506441012894129
Полученный391464410128142212283352421483559634728803
супернатант475264410128104174247310380455517579641715776
используют8516683012875138213282353416471542645706
для15916683012872142206
определения18336683012870145216278349412482544618694758
экспрессии26266683012860129191266335398461522597671
транскрипционных3333668301286113119426833039846854261869276783791298710801150
факторов.4518668301289115422228335242249355950796685012635
Определение120569240128101176246309380442512575648724786
содержания202669240128138208279342411508571645720784
VEGF,284569240128178263364442477
HIF-1α,335769240128177223301350421495530
NF-κBp50392169240128178255302373467536606676
и463369240128150
NF-κBp65.481769240128178255303374468538607678714
Образцы85171650128101172243306361435529
осветленных141671650128102165231293355425486560636729800
гомогенатов22517165012891160250318376439513575637706772
опухолей305971650128103177247315386456518593
используют368871650128108171244314384448503577681742
для446671650128105176240
определения474171650128104178248310382444514576651725789
содержания8517406012862133203266336433495569645710
VEGF159674060128118203304381
(R&D20127406012863157266368
Systems,24147406012895165218257320430482518
DSL,296774060128117195281315
США),331874060128110252353399434
HIF-1α,378774060128118164242291361435471
NF-κB429274060128118195244315408
p5047357406012887157227
и49987406012891
NF-κB512474060128118196243314407