222
6331347818011156112
митохондриях.851596012889164225296366435510581651726791860896
Таким17825960128129191259334423
образом,22405960128114185254317373443531566
по28415960128119188
интенсивности30655960128119193254316391454528595670739802863938
флюоресценции403859601281342043093794485115736477107858609341009
можно50835960128133202299373443
судить851839012862133202278339404
об1289839012870142
уровне1467839012870138208275350412
АФК19148390128101211304
в2253839012867
клетке.2354839012868138200262330392427
Ход12051080012886155227
работы.14671080012820027034141051260720741080012835
Визуализацию2144108001282242983534244845546296857478228971003
клеток318110800128199269331393461530
выполняют374610800128197290365435505580644750811
с459310800128192
помощью481910800128205276364434543607711
инвертированного851132101287515121727934841048555462469175382890297210301099
микроскопа198513210128131206274344414476544614689752
74277213210128112181
Olympus298913210128143181252359427498553
CKX-53357713210128135237338387457528
(«Olympus»,41411321012888158259297368477544615670741775
Япония).495113210128135210281356432496542578
Затем8511563012870133194257346
клетки12321563012879150212273341415
снимаются16831563012874149224312375478539602666
с23841563012874
лунок,24931563012882153226297365400
лизируются29281563012882157212287358429532593655719
с36831563012874
помощью37921563012886157246316425489593
0,2%44201563012882117187304
Triton47591563012898144183222292362
X-100516815630128101151222292362
(«Sigma-Aldrich»,851180501284711719423330441447452162266173177881787994910201055
Германия).194118050128138199270359421495571635681716
Количественную2693180501281502202913644354985596196857478238989711074
оценку380118050128128203266340409479
уровня431318050128129198269336409474
свободных482218050128120186255327397467543637706
радикалов8512046012870133203279347409479549615
в15012046012892
лизате16292046012895170226288349412
клеток20742046012895165227288358427
определяют25362046012896171240303375436507571677737
по330820460128101172
степени35152046012889150212286349424498
флюоресценции404920460128117187292361431493556630692767842916992
(λext50762046012873141202273311
=542320460128105
5798512287012870141210
нм,109722870128109199234
λem136622870128102164273
=167222870128114
599182122870128105175246
нм)210222870128109198245
с23822287012897
помощью251422870128109180269338447511615
спектрофлюориметра3164228701289617223430336443350459466476983890898410731134119512651327
(«Shimadzu45262287012881151229303343452512582645716
RF6000»,5277228701281282068512529012870141210280351385
Япония)12722529012893169239314389453500
и18082529012875
пересчитывают19192529012875138207269332402477538631698760867928
на28832529012875137
количество30562529012869138208283354416479540606675
клеток37672529012869139201262333400
(счетчик42022529012848110181243303374449518
и47562529012875
анализатор48662529012863137200270345401463523592662
жизнеспособности851277101289717222830336542750257263470477485091998210441117
клеток200427710128129199261323393461
«Countess249927710128132225296365436474537591646
3317927710128131
Automated334627710128163233271341450510549612682
Cell406427710128155218256295
Counter»,439527710128154224294364403466512583617
США).504727710128156297399445480
Приготовление85130120128101171247304373435505572642704778853915
клеточных180130120128123193255315385456530625695
лизатов253130120128125200255318379448514
клетки308030120128126196258319387463
культивируется357830120128123193262325386461528603673744804866928993
в460630120128121
6-луночных476230120128125173243313386457528603697767
планшетах.8513254012875145207282391453515576646682
После156832540128185254317387449
окончания205132540128155223292368438500574650715
экспозиции280032540128145213275349420475550625700775
клетки361332540128152222284346414488
снимаются413632540128147221296385447552613675740
с491132540128147
лунок509332540128155225298369436
раствором8513495012870133195257323392462532621
трипсина-Э.15073495012862130206280343417492555602695729
3.3.8913983012670106176211
Определение113739830126109190268330401463541603684765826
в19993983012675
липидном21083983012678159240320391472541637
экстракте27803983012661143204272351420501570633
антиокислительной344839830126701512183003704515315936717528218839611036111511851266
активности47513983012670151220301377458527589658739
липидов25074224012679160240321391462537
по30804224012680150
Глевинду32664224012689167229305386466536606
Принцип120544610128101171242312381450521
метода.176144610128103165267335407477512
Содержащиеся23224461012894163234296366463525633708770832897
в32554461012879
составе33704461012874145207269330396459
липидного38644461012882157232308379454524582651
экстракта45504461012873141204265334397465526589
ткани51734461012874142205279353
антиоксиданты8514702012862137199274344412474549620682756818912
взаимодействуют17984702012810516022229638545552658966372678785392310261087
с292047020128100
синтетическим305547020128101176250312374436511580643705773848937
стабильным402747020128102163225295371440504579673762
свободным482547020128100166235306376447523616705
радикалом8514945012870133203279347409479549638
α,α11524494501281521882601785500008245
-18304945012847
дифенил-пикрилгидразилом191249450128151225316379453528598645719795862933100710781135121012811350141214671542161216831772
(ДФПГ),371949450128125221332433513560595
инактивируя434949450128153229291359420495562635706776839
его.522349450128142199269305
Поскольку85151860128101171234302371442505573643
ДФПГ152951860128135246347428
является199251860128105171241305367429491556
окрашенным258351860128110178247310418479555629723812
веществом,343051860128105168276338400462528598686721
инактивирование41865186012811418925231938045652259766773680386594010141077
его529851860128102159228
сопровождается8515427012862133208278347414484580652714776837900964
снижением18515427012862136210307369444519581670
степени25565427012863124186260323397472
окраски30625427012870139208270332400475
раствора.35725427012870132195256322391462524559
Реактивы.12055668012886148218284385456516611646
1.12055911012870106
Р-р13465911012889136206
ДФПГ15995911012896207308388
в20225911012878
хлороформе.21355911012881152221291361452521592680743778
Концентрацию29595911012894164238314375450512581644718793898
этого38925911012872133203264333
вещества42615911012878140248310371433499561
подбирают48565911012887157228300374444506611673
так,8516152012861124192227
чтоб111361520128101163233304
при145261520128105175250
добавлении173761520128102173244307372442503578654728
0,2250161520128101136205
мл274161520128122192
р-ра296761520128101147218279
его32806152012893151221
к35376152012899
2367261520128100
мл380761520128120190
хлороформа403161520128100171240310380470540610699762
оптическая482861520128100175237311382444505573636700
плотность8516393012875145215277351421484545609
р-ра14936393012871119188251
при17796393012875144219
51720326393012871141211
нм22786393012875163
составила24766393012863133195257318384459529592
0,5-31016393012870106176225
0,6.33616393012870105174210
Ход12056634012886155227
работы.14676634012892163233303405500535
Во203766350128116186
флакон225966350128112181243312382457
из-под27516635012898153200275345416
инсулина,32026635012898172235305373449524587622
закрытый38596635012878140208277371433527601
чѐрной44966635012893155224300369445
бумагой,49766635012893163251313370441516552
наливают8516877012875138208283349412516577
214636877012892
мл159068770128110180
липидного18056877012891166240315386461531588658
экстракта24996877012881150212273342405472533596
исследуемой31306877012896158220290353424494555644714790
ткани39556877012883151212287361
(см.43526877012871132221256
раздел46436877012891154209281342412
«Забор5090687901269551866877012870133203273343
материала8517118012889151213275345420482552615
и150171180128139
подготовка167571180128141210282340409471541608675737
его244771180128128186255
к273771180128134
исследованию»)2906711801281432052673373984695396066687438179239931039
и398071180128141
0,2415671180128136172240
мл443171180128154224
р-ра469071180128135184254317
ДФПГ.504271180128160271373453488
Перемешивают85173600128101163233296385447556629696758863924
содержимое181073600128171240311374443540615704774835
флакона268173600128199269332400469544606
струѐй332273600128171233303374434509
аргона,386773600128171241298368443505540
закрывают444173600128164227295365459526588693753
его523073600128171228297
полиэтиленовой8517601012875146216290350411486557619692763830898974
пробкой18617601012875146215286355424500
и23987601012875
помещают25107601012876145234297403466571631
на31787601012876137
1033507601012872143
мин35317601012888164238
в38047601012868
темное39087601012863125214289358421
место.43667601012889150212274344379
Определяют478276010128102176247308380442512576681742