191
6231347818011156112
3.1.1036844012670106176211
Определенин12828440126109190268330401463541603684765845
количества2162844012681150229310389452513582658727
активных2924844012671151219300376457566635
форм3595844012697166244340
кислородас3970844012681161223302372450519590659724
помощью4729844012681151246316435509616
красителя24271085012681159229291372441504582658
H23119108501261093229113908145
DCFH-DА.327410850126101202287395442543644678
Принцип.120513210128101171242312381450521556
Активные179713210128170238299374441514609671
формы250313210128159229299388482
кислорода302113210128136210273343413482552623686
(АФК)374213210128114216326419466
взаимодействуют42431321012813419025132741648655761869475681888495410571118
с539613210128130
красителем8511563012868138201264338399462532593682
2,7-156715630128185221289338
дихлордигидрофлуоресцеин194015630128185261330401470540611686744818890960102911211191126113291400146215251599166117361811
диацетата378615630128185261322398460522583644706
(H2DCFH-DA)4526156301281622633334355286067077568589581005
(«MolecularProbes/Invitrogen»,8511805012847117241311351413475545584647693771817887957102010731113116012291299133813771424149415631626169517661800
«CA»,268618050128187281382452486
США).320718050128211352454500535
Это377718050128210271341
нефлуоресцирующее41531805012819125334441448455362368674882389896710381141124913111373
вещество8512046012866129237299361423489559
окисляется16462046012870139213276346410471533595659
под25442046012875145216
действием29972046012871134208271331397472535624
АФК385820460128101212305
с44002046012862
образованием46992046012870142212274330399465528603677739828
флуоресцирующего8512287012891161231299370433495570645715786889997105911161187
2,7-дихлорфлуоресцеина2073228701287010617622329336943850957764873880887994710171080114212181279135414301492
(DCF).36002287012846148241319366401
H24035228701281014137234308245
DCFH-DA.418322870128101194273373419520621656
Ход12052529012810113062529012870142
определения.148325290128121191261323394456518580650718784819
H22389252901281012489258408245
DCFH-DA253525290128101194273374420521622
добавляли319225290128122193264327393461526596671
к389825290128120
клеткам405325290128119189252313380442531
до461925290128122192
получения484625290128126196267337406468543619683
конечной8512771012868138213276346420491566
концентрации145227710128142211287361424498560628691766841915
5240227710128145
мкМ,258227710128163230355390
инкубировали300727710128149223291361431506577648714775845920
10396227710128143214
мин.421227710128162236311346
Затем459327710128144207268331419
клетки504827710128140210273334402476
промывали8513012012875146215305398464526597671
фосфатно-солевым15573012012811318224533539745853260365171378385391598210751164
буфером27563012012892163252314385455543
и33343012012896
анализировали.34653012012884159222292367422496566636703765835909944
Количество444330120128114185255330401463524586652722
АФК520030120128123233326
определяли8513254012870146215278348411481546616690
флуориметрически1580325401289116123129937044553459665772880287393599910661141
в27563254012871
96-луночных28623254012874144191261331404475545620714784
планшетах36813254012879150212286394456518580649
на43653254012879141
приборе45413254012879149224295365435497
EnSpire50783254012886154232303341388449
Equipment8513498012886155226265335445505575615
(Финляндия),15013498012857168242317387451526596672736783818
длина23543498012882152225301362
волны27523498012876146217290385
возбуждения31713498012877147203274345440511574648724788
составляла39943498012873142204266328394464527597659
ex468934980128149218
=49433498012888
48850663498012881150220
нм,53213498012885174209
длина8513744012871142217291354
волны12403744012866136206281374
испускания16503744012875136211282343411473548624688
em237337440128137246
=26523744012879
52827653744012870141212
нм.30113744012875164199
АФК120539880128101212305
детектируют15453988012878141202265333394469539610713774
методом23623988012889151213283354424513
проточной29103988012882152222283352423497568642
4535873988012877147
цитометрии37703988012882156218287376438500568644718
(Partec45243988012853131194240278341403
CyFlow®49693988012894164240279350452558
ML,85142290128125211245
Германия)113142290128137200270359422495570635681
и184842290128131
флуоресцентной2014422901281462162863544254885506256887628248999681043
микроскопии309242290128145219287359430493560630705779854
(Axio398242290128103204274312382
Vert,439942290128158219266305341
«Carl477542290128126219281328367
Zeiss517742290128142204243297351
Microscopy»,85144710128125164227273342397459529599670738773
Германия).16584471012881144214304366440515580626661
Константу23534471012894164240301363425500562634
скорости30204471012862130200271341403465539
образования35954471012870140210273328397464526601675740
DCF436944710128101194272
рассчитывают46774471012870132194257327402463558624685792853
по8514712012875146
углу10324712012877133203274
наклона13394712012882145213283353428490
прямой18654712012881151215304374448
на23494712012882144
графике25284712012865134197286362429492
в30574712012873
зависимости31654712012863125191266329404492562625685760
уровня39604712012878146217283358422
флуоресценции44234712012891161231299370433495570633707782857931
от53894712012877139
времени.8514954012866136199288350424500535
Биологическое12055195012883153223284354409479545608670735805868
значение.210851950128187257325393455525594657692
Продукция283651950128234304374445515582657732796
АФК366751950128235345438
увеличивается4140519501282032683304014755466216877508128739361000
при517551950128208278352
деструкции8515437012871134197258327398464539615690
опухолевых15765437012870145216284355425487553647717
клеток.23295437012868138200261330399434
3.2.14765924012670106176211
Определение172259240126109190268330401463541603684765827
продукции25845924012681158228300370451531612692
активных33115924012670151220301377457566635
форм39815924012698166245341
кислородапри43575924012680161223302371450519590660741818899
помощи21156166012681151247316435515
флюоресцентных2665616601269717428235243049255563669877984792810381107
зондов.38086166012656125206277347423458
Принцип.120564030128101171242312381450521556
Исследуемые179764030128238300362432495565635696785879942
клетки277464030128203273336397465539
культивируют334864030128205275344407468543611686756827930991
в437464030128202
24-луночных461264030128206275324394463537607678753847917
планшетах,8516644012875145207282391453515576646682
инкубируют156866440128162237305375445521591662765826
их242966440128163233
с269866440128151
Н22884664401281903075669908245
О23120664401281013220669908245
и330166440128164
БСО.350066440128169263364398
Усиливается393366440128188250324395469535597660721783848
выработка481666440128155249318381451522583651713
внутриклеточных85168850128661412122713424174865566186797498198949881058
АФК,194568850128159269362397
которая237768850128126197258329398461526
оценивается293868850128127203264338414480543605666727792
с376568850128121
помощью392168850128134203292361470533637
окраскиклеток459368850128128197267330391459535602672735796866934
MitoTracker85171280128125164203273359405468530599662709
Red159571280128177240310
CM-H21940712801281773023504512391718308245
XRos247171280128186279350404
(«Invitrogen»,291071280128132202248317387426465512581652713784854889
США).383571280128178320421467502
Восстановленный43707128012817824931137443549757164170877883991498910831158
дигидроксирозамин8517369012871147205279350420490559621695764835891953104111161190
проникает207673690128143213283357433501563625686
в279773690128135
живые296773690128163238304398461
клетки346373690128136206269330397472
и397173690128141
окисляется414873690128137205279341411476538599662726
АФК490973690128170280373
до531773690128138209
флюоресцентного851761001289116126633540646853060566774280487894810061075
зонда,196276100128110180255327389424
который242176100128123193255324394489563
связывается301976100128117184248305399465528590651714778
с383276100128118
тиоловыми398576100128116191260331401467560649724
группами474576100128112181252325401463552627
в540876100128121