197
5131347818011156112
2.17.1743601012670106176245281
Определение21036010126109190268330401463542604685766828
активности2965601012670151220301375456526588657739
гипоксантин3738601012664145225295376438507588657738818
-4590601012648
гуанинфосфорибозилтрансферазы143584401266413420428636644754361267577284192010011070114011971277135514241503157216531715181218731951202120782188
(ГГФРТ)в3658844012646136223343428521568644
биологическом4336844012671152222301370434515594656718798869964
материале16291085012696166235297375456525604667
по23311085012681149
увеличению25151085012671146209286367445508588669776
уровня33251085012671149219295376452
инозинмонофосфата381110850126811612312883694495446146957658629319941091116012291299
Принцип.120513210128101171242312381450521556
ГГФРТ17971321012895177288365451
катализирует22831321012883144205267337412467542612682743804
реакцию31221321012885148211279353428533
взаимодействия36891321012882137199274363434504567641704765831906970
гипоксантина46941321012873147222292361423484559621695770833
с8511563012862
АТФ94815630128102187297
с12801563012862
образованием13771563012870142212275330399466528602677739828
инозинмонофосфата224015630128751502202763514255145836597288198899511041110311641226
(ИМФ):35011563012847149273383430469
Гипоксантин12051805012881157231301369431494568630705779
+20191805012880
АТФГГФРТ2133180501281021872972431177508251103175230280
ИМФ273418050128101226337
+31051805012879
АДФ.32191805012810119630735261805012835
Об120520460128101172
активности14132046012890158219294361435505567628703
фермента215120460128118180250339402477538600
судят27862046012890160230295356
по317820460128102171
приросту338520460128102172246317386449510581
уровня39992046012898167237304379444
ИМФ447820460128129253363
или487520460128102173247
АДФ,515820460128128223334369
который8512287012868138200269340434509
определяют13942287012870145215278348411481546650710
методом21392287012888151212282353424513
тонкослойной26872287012862130206273343405475545620695764840
хроматографии.35612287012870141210300361422492550619682772847922957
Реагенты.12052529012886148218273336405507601636
1.8512771012870106
0,199227710128114149218
мл124527710128133203
Трис-HCL148327710128130199274336384486579664
буферный218127710128116186275338408484577653
р-р286927710128113161230
(рН31352771012891160262
7,4),343127710128114150218266301
содержащий376727710128106175247308379475537645719795
5459727710128113
мМMgCl24746277101281332563844545475865331282708245
и541227710128118
фосфорибозилпирофосфат8513012012891161224314384454529600670726801871945102010901159125013201383147315351596
в24823012012867
качестве25833012012869131202263325386453515
субстрата.31333012012862131201263325395458519581618
2.8513254012870106
0,19913254012870106176
млр-ра12023254012889159228275344407
14С-гипоксантина16443224082458917343254012894140198272347417485547610684745821895957
(0,0827273254012846115151221290
Мбк).305332540128124194263310345
3.8513495012870106
0,0059913495012870106176246315
мл13423495012889159
0,415353495012870105174
М174534950128124
калий-фосфатного1905349501286713019927334939748855762071077283490897810361105
буферного30463495012871141231293363438509566636
р-ра37163495012870119188250
(рН40023495012846116218
7,4).42533495012870106175222257
Ход12053737012886155227
работы.14663737012871140211281382477512
В12053979012894
пробирку,133439790128134204275345420490558628662
находящуюся203139790128134197267338409474582652755817882
на294839790128135197
водяной317939790128126196267332406475551
бане376439790128131194268331
при413039790128133203278
температуре444439790128120182271346407478540602672740803
3705282397901281291995485394908245
последовательно85142200128751462082783414114805476096717338038669411010
вносят:189742200128198273343406470531570
0,1250242200128203238307
мл284442200128222292
Трис-HCL316942200128219289364427475576669755
буферного395942200128204275364426496572642700769
р-ра476342200128202250319382
(рН518042200128180249351
7,4),содержащего85144610128701061762232583203894605235926897528609229791049
5193644610128126
мМ209644610128146271
MgCl22402446101281832533483872788451608245
и294244610128133
фосфорибозилпирофосфат3110446101281472162793704395095846557267828559261000107511471216130713761439153015921652
в479844610128123
качестве495644610128125187258320383444511573
субстрата;8514702012862133202265326397459521583622
0,115094702012890125195
мл174047020128110180
р-ра19554702012890137207270
14С-гипоксантина;22824672082458923724702012894140198272347417486547609684746820894956995
0,00534024702012892127196267336
мл377447020128110180
0,439884702012892127196
М424147020128125
калий-фосфатного44014702012889150220296371421510581643734796858931100210591129
буферного8514945012871142231294364440509567636
р-ра15234945012891139209271
(рН18294945012868138240
7,4).21034945012891127197243279
После241749450128122192255325387
3028394945012891162
мин303649450128110185260
инкубации33314945012896172240311380443518593667
реакцию40334945012892155217285359434539
останавливают46074945012891154215277353414480551625692754859919
добавлением8515186012871142213276342412474548623686773
0,116605186012870105174
мл18695186012889159
0,420635186012870105175
н22725186012875
р-ра23825186012871119188251
хлорной26675186012870140210280355425500
кислоты.32015186012868143205275345407500535
Разделение12055427012878140196267330400462536611674
меченых191454270128177239310372446540611
субстратов256054270128150220290353414484547608677744
и333954270128164
продуктов353754270128164234304375446512573644710
реакции428354270128158221283351426500576
проводят489554270128162233302369438510574635
методом8515669012889151213283354424512
восходящей13985669012874144206276345417481589651726
тонкослойной21605669012868138212281350413483552627702772847
хроматографии30435669012876146216304367428498556625688779853927
на40075669012882144
пластинках41855669012882153215277337412487556618688
силуфол49095669012868143214284373443514
в54585669012873
течение8515911012861124194257332406469
1,513555911012892127197
часа15885911012892154217279
смесью,19035911012885172233296360465499
содержащей24375911012885155227288359455517626688762
бутанол:метанол(25%):аммиак:вода32355911012893163223285360431501540629692753814889959102910751144121513311378141714791568165717311794186219001967203721072170
в54425911012889
соотношении8516152012862133202264339408517579653729803
6016906152012880149
:18756152012848
2019596152012878148
:21436152012848
122276152012879
:23426152012847
2024256152012879149
по26106152012884153
объему.27996152012880151224285374444478
Rf33216152012894140
для34976152012880151215
гипоксантина37476152012867142217287355417480554615691765828
равен46106152012880143209270345
0,36,49916152012878114184253289
для53156152012881151215
ИМФ85163930128101226337
–12226393012870
0,07.13286393012870105175245280
Измерение120566350128101156245307378440515590653
радиоактивности18936635012814420727835242248555261468975683190096310241098
продуктов302766350128149220290360431497559629696
реакции,375866350128146207270338412488562598
элюированных439166350128135205310384454524591654727802896966
с539366350128138
хроматографической85168770128701412103003624234925506196827738479189791042111011791254
пластинки214268770128103174235297358433507576650
проводят282868770128102173242309379450515576
в34406877012895
течение35696877012889152222285359434496
141006877012898
часа42336877012899162223286
водой.45546877012895165236305381416
Подсчѐт500568770128130199270332403465525
бета-излучения8517118012871134196258305379434504574643705780856921
проводят18067118012875146215281351423487549
на23907118012875138
жидкостном25627118012897172242311380443504579649737
сцинтилляционном3335711801286213721228734842349356462870277784792199710661154
счетчике.45257118012862133195257327402470532567