211
4831347818011156112
Принцип.ФРПФС1205596012810117124231238145052155717625960128111188290400493
катализирует2291596012881143203266336410466541610681742803
реакцию3129596012883146208276351426531
взаимодействия3695596012879134196271361431502564639701762829904968
гипоксантина4698596012871145219290358420482557618693768830
с851839012862
АТФ9488390128102187297
с1280839012862
образованием1377839012870142212275330399466528602677739828
инозинмонофосфата22408390128751502202763514255145836597288198899511041110311641226
(ИМФ):3501839012847149273383430469
Гипоксантин8511080012881157231301369431494568630705779
+16651080012880
АТФФРПФСИнозинмонофосфат1780108001281011862972076105008272127192265324240110800128101176246302377453541611686756846916978106911321192
+36281080012879
АДФ.37421080012810219730740501080012835
Об120513210128101172
активности141313210128140208269344411485555618678753
фермента220113210128169232301390453526588650
судят288613210128140210280345407
по332813210128152223
приросту358513210128153224299369438501562633
уровня425113210128149217288354430494
ИМФ478013210128178303414
или522813210128153223298
АДФ.Последние85115630128101197307343443513576646708780854929992
определяют18761563012871146216278349412482546651712
методом26221563012889152213282354423512
тонкослойной31701563012861129205273343406476544620694764839
хроматографии.40431563012870141211300362422493550621682773847923958
Реагенты.12051805012886148218273336405507601636
1.8512046012870106
Трис-HCL99220460128109179254316363464557643
буферный16702046012895165255317387462557631
р-р23372046012893141210
(рН25832046012870139241
7,4),28592046012894129198245280
содержащий31742046012886155227288359455517625701775
539842046012893
мМ411220460128113238
MgCl24410204601281251952893274737210108245
и48212046012875
рибозо-5фосфат493120460128931692393093654354825528512287012891161224314376438
в13242287012866
качестве14252287012868130201262325386452515
субстрата.19752287012861131200263324394457519581616
2.8512529012870106
Р-р9912529012878125195
14С-гипоксантина12212499082459113122529012894140197272346417484547609683745819894957
(0,0823042529012847115151221290
Мбк).263025290128125195263310345
3.8512771012870106
0,49912771012870106176
М120127710128125
калий-фосфатный1361277101286813120127535039748855762071077183390810021077
буферный24732771012872142232294364439533608
р-р31152771012870118187
(рН33382771012847117218
7,4).35902771012870105176222257
Пргитовление120530120128101171226296397467528590651721791853
гемолизата20933012012899161250320381451506576677747
эритроцитов.28763012012810417524434641648655562672879685737363012012835
Кровь380630120128138206277344408
белых424830120128116177247342411
беспородных469430120128116177240315384455525596671765834
крыс8513254012868138232295
собирали118132540128102171242317387449519595
в181132540128105
пробирки195032540128114184254325400470539613
с259832540128102
гепарином.27343254012896159233295366440515584673709
Эритроиты347832540128131201275337406477551613706
отделяли421932540128109171241303373438508582
от483632540128109170
плазмы504132540128115185247302391484
центрифугированием,851349501287513821327534341850957963571178185191898010551129119212791315
двухкратно22013495012897163234302370441503565640709
отмывали29463495012895156245338405467537612
ихот359334950128101171240302
плазмы393034950128101171233289378471
физиологическим44353495012811719224832339246353359066573679786092810021091
раствором,8513737012870133195257323392462532621656
затем154237370128115177239301390
лизироваливнесением196737370128129204260335405475542604674747814889951101410751150122512871375
двух337737370128131198268336
объѐмов374937370128129201274336425495562
дистиллированной434637370128131205268329404474544619688758825887962103611061180
воды8513979012866136208302
по118839790128103173
отношению13963979012898160234304412474549624728
кобъѐму21593979012896166237310372461531
упакованных27243979012899173237305375442505578654747818
клеток.35763979012897167229291359428463
Полученный407439790128130199270340408471546621715790
гемолизат48993979012886148236306377450506568630
центрифугировали851422001287513821327534341850957963571178185191898010501124
3020114220012890160
мин220742200128110184259
на25024220012898161
холодепри26984220012890161231300372434510579655
1700gи33884220012892161231301372446
сохраняли38704220012883153223294355430495566639
в45454220012887
холодильнике46674220012891162232302373449519583656731800861
при8514461012875146220
–10оС110744610128169239309141644310824514624461012894
для159144610128169240304
последующего193044610128173244306376439509579682790852910980
эксперимента.294644610128159227290363426496571660722796858920955
После393644610128200270333403465
размораживания44354461012816923228737644651657867474981687995210281092
эритроциты8514702012860130206268336407482556618712
центрифугировали15984702012822929136642849757266373378986493510051072113412041278
на291147020128230292
холоде.Полученный32374702012822529536643450656860370477484491498310451120119612901365
супернатант463747020128217287360423493568630692754828889
использовали8514945012875138213282353416471542608670740814
как17004945012869131199
источник19334945012875138198268339413488557
ферментов25254945012891154223312374450511580647
в32074945012865
синтезе33064945012863138213275337392453
нуклеотидов.37944945012875146212282345415476551622693759794
Ход12055186012886155227
работы.14665186012871140211281382477512
В12055427012894
пробирку,133454270128109180249320396465534604637
находящуюся200754270128109171242311383447555625729790855
на289754270128110173
водяной310554270128100170242307382451526
бане366654270128106169243305
при400654270128110179254
температуре42955427012896158247321383454515577647715778
3705108542701281051755288539708245
С,536954270128127162
последовательно85156690128751462082783414114805476096717338038669411010
вносили:189756690128134208278341415485560599
0,1253156690128137172243
мл280856690128157227
Трис-HCL306956690128154222298361409511604689
буферного379356690128140210299362432507577635704
р-ра453356690128137185255317
(рН488556690128115184286
7,4),520656690128138173242289324
содержащего8515911012862133203266336433495603666722792
516795911012879
мМ17945911012898221
MgCl22061591101281251952893272389596608245
и24695911012885
рибозо-5-фосфат258959110128781542242943504204685375846757458078989611021
в36455911012876
качестве37565911012877139210272335396462525
субстрата;43165911012871141211274335404467528590628
0,149805911012879114185
мл52005911012898168
рра540359110128798516152012870133
14С-гипоксантина;10376122082458911276152012894140198272347417486548609684746820895957996
0,00521586152012888124192263333
мл252661520128107177
0,427376152012888123192
М298261520128125
калий-фосфатного3142615201288614721729236741850857864073179485592999910561126
буферного43046152012888157246309379455525583652
р-ра49926152012888135206268
(рН52956152012865134236
7,4).8516393012870106176223258
После114463930128119187250320382
1515616393012888158
мин175463930128106180256
инкубации20456393012892167236306376438512588662
реакцию27426393012888151212280355430535
останавливают33116393012887150211274348410476547621687750855915
добавлением42616393012888159230291357428489564640702790
0,5.50866393012888124192228
мл534963930128106176
0,48516635012870106176
н10616635012875
р-ра11716635012870118187250
хлорной14546635012871141211281356426501
кислоты.19896635012868142205275345407500535
Разделение12056877012878140196267330400462536611674
меченых191568770128176238309371445539610
субстратов256068770128150220290353414484547608677744
и333968770128164
продуктов353768770128164234304375446512573644710
реакции428368770128158221283351426500576
проводят489568770128162233302369438510574635
методом8517118012889151213283354424512
восходящей13987118012874144206276345417481589651726
тонкослойной21607118012868138212281350413483552627702772847
хроматографии30437118012876146216304367428498556625688779853927
на40077118012882144
пластинках41857118012882153215277337412487556618688
силуфол49097118012868143214284373443514
в54587118012873
течение8517360012861124194257332406469
1,513557360012892127197
часа15887360012892154217279
смесью,19037360012885172233296360465499
содержащей24377360012885155227288359455517626688762
бутанол:метанол(25%):аммиак:вода32357360012893163223285360431501540629692753814889959102910751144121513311378141714791568165717311794186219001967203721072170
в54427360012889
соотношении8517601012862133202264339408517579653729803
60:20:1:2016907601012880149189258328367437476546616
по23427601012884155
объему.25337601012878150223285374444477
Rf30547601012894141
для32307601012882153217
фосфорибозилпирофосфата349176010128911622243153844555296006707268008709451019109011611252132113841474153615971660
равен51867601012880143209270344