﻿236
4731347818011156112
образующийся851596012870142212274330400503611686761824888
в1775596012891
результате1901596012893156211281350414474537598660
предыдущей2597596012899170233303398468539645708783
реакции,3415596012895157219287362437511547
до3997596012896165
мочевой41985960128113182253315381451526
кислоты.4760596012892167230300369430523559
Еѐ53545960128110172
определяют851839012870146215278348411481546651711
спектрофотометрически.159783901286213619926732839846855962969176084991197310411117118712491312138014541490
Реагенты:1205108001288614821827333640550760118051080012839
1.8511321012870106
0.0512051321012870106176245
М148613210128125
фосфатный16451321012891160223314375437512605681
буфер,23601321012871141230292362398
рН27931321012870172
7.5.29991321012870105176211
2.8511573012870106
Рабочий12401573012878140212282352427502
раствор17771573012895158220282348417487
инозина:230015730128100174245300374450512550
528861573012894
мг301615730128115172
(фирмы32241573012872162237307396489
Reanal)37781573012858383515730128941562182893513894225157301285842811573012847
растворить43631573012896159221282349417487563624688
в50861573012892
552131573012895
мл534315730128115185
дистиллированной851182101287114721027134541548555962970076682790297710471122
воды.20081821012888158229324359
Если240218210128108170240315
инозин27521821012897173242298372447
не32351821012896159
растворяется,34291821012892155216278344414483548611672733798833
добавляют42971821012894163234297363433497602664
149961821012892
каплю51231821012891153227298402
1N8512062012870172
р-ра10582062012870117186249
NаОН.134220620128101163264365399
Готовится17762062012881152213282348423484547611
в24222062012867
день25232062012872134208273
опыта.28302062012871145239301362397
3.8512303012870106
Ксантиноксидаза120523030128941562182933554295055746437057798509139681030
(коммерческий22712303012858127196285374437506577639700769844918
препарат)32252303012886156219293355424487548596
суспендируют38572303012874144204280342417488564633704807868
в47602303012879
2,348742303012881118188
М510923030128125
р-ре52692303012882130199262
(NН4)2SO4,8512546012847148249319366436515616684720
8.316052546012871106176
ед/мл.18162546012863133171261329364
Ход12052787012886155227
работы.1467278701287914922028939148519532787012835
В20322787012894
опытную21612787012878153247308383453556
пробирку,27522787012884155225296372441510580614
находящуюся34012787012884146217286358422530600703765830
на42662787012885147
водяной44482787012876145217280356425501
бане49842787012880142216279
при52982787012883154228
37ОС,851302801287014199329980826510573028012894129
последовательно122230280128761452082783404104805466096707328028649391010
добавить22673028012874143214277343418479543
0.128463028012871107176
мл30593028012889159
сыворотки,32513028012865159226296365436498565640675
2.639613028012872108177
мл41753028012889159
0.0543683028012873107177248
М465330280128125
фосфатного48153028012891160223314376437512581639708
буферного8513269012871142231294364440509567636
раствора,152332690128121184245306373443512574609
0.06216732690128121157227296
ед.249932690128113184219
ксантиноксидазы,27533269012811918224431838045553260267073280787894199610891125
соответствующие39133269012811318325331538144350456562769376386697410491111
8505932690128122
мкл.521632690128140208278314
Смешать.8513510012894183245353415477541575
Инкубировать146135100128140215284354423499570639706768830894
15238935100128109180
мин.260435100128128202278313
После295235100128140210273342404
этого33913510012899160231288358
добавить378535100128111180252314380455517581
0.25440135100128109144215284
мл472035100128128199
рабочего495335100128109172244313384447503572
раствора8513753012870133195257323392462524
инозина14103753012888163233289364438501
инкубировать19463753012889164232302372448518588654717778842
при28223753012888158233
37оС.30913753012883152324437230824532903753012894129
Спектрофотометрировать345437530128106181244312373442512603673734804894955101610851161123013001366142914901554
каждую50423753012881144241312383486
минуту8513994012889164239310370440
опытную132439940128112187282343419489592
пробирку195139940128117187258329403473542612
против259739940128116186257318392459
контроля309139940128109178253315385454525589
при371539940128116186261
длине401139940128112182257331394
волны444039940128107177247322416
293489139940128112182251
нм517839940128116205
в541839940128107
течение8514235012861124194257332406469
1013554235012882152
мин.154242350128102176251286
В18754235012893
качестве20034235012880144215277339401467529
контроля25664235012881151226288356426497561
используется31624235012887149225294364428483553614675737802
смесь,39994235012875164226289353388
состоящая44204235012875145208270339404511573638
из50934235012887142
2.7552714235012881116187256
мл8514477012889159
0.0510444477012871106176246
М132544770128125
фосфатного14844477012891161223314377438512582639709
буфера22294477012871141231293363426
и26894477012875
0.2527994477012871106175245
мл30804477012889159
рабочего32714477012871133204274345407464533
раствора38404477012870133195256323391461524
инозина.43994477012875149219275349424487522
Активность120547190128101169230306372447517579641705
ПНФ194447190128201302412
рассчитывают239047190128170232295357428502564658724787892953
по337747190128175244
интенсивности365747190128174249311373447510584650725795857919993
образования468447190128169241312374429499566628702777841
мочевой8514960012889159230292359428503
кислоты,13894960012870145207277347408502537
используя19634960012875136212282353416471541604
формулу:26044960012891161232320391459530567
АПНФ3208496001281023311501608265130201
=35494960012879
ΔЕ36654960012891176
х38764960012872
1039834960012872143
х41614960012872
3.042684960012871107177
мкмоль/(10044824960012889157246315386449488535604674745
мл52634960012889159
х54564960012872
мин),8515212012889164239287322
где12085212012858128191
Активность143552120128101169230305372447517579641703
ПНФ217452120128101202312
=25235212012879
0.112.6263752120128711071772816521201287728925212012870141176245
,31745212012835
∆Е32455212012886172
–34505212012873
изменение35605212012876131220282356419494568631
экстинкции42255212012861129192252327402471545619695
опытного49555212012871146239301376445503573
раствора8515458012870133195257323392462524
за14105458012868131
115765458012882
минуту169454580128102177252323382453
(в21825458012859128
среднем);23455458012876146209280355417506553591
3.029715458012883119189
–31955458012885
объем33145458012883155228290379
инкубационной37285458012888163232302372434508584653729803874948
смеси47125458012875164226288363
(в51115458012860126
мл);527254580128101171218255
108515701012870141
–102857010128107
пересчет117057010128114176245308370441503564
на176957010128113176
10мл;198057010128107177267337374
12.6239057010128108177213283
–270857010128109
коэффициент285357010128106177237328418493568643706780841
абсорбции373057010128100171233303373445519593669
(экстинкция)44335701012885145213276337412487556631705770817
для528557010128109180243
мочевой8515942012889159230292359428503
кислоты;13905942012896170233303372433528566
0.119915942012899135205
-22315942012877
количество23435942012897166237311382445506567634704
сыворотки30825942012891184251321390460522590665
(в37825942012876142
мл).395959420128117187233268
За42625942012899160
144575942012899
ед.45925942012890162200
активности48265942012891160221295361437506569630704
ПНФ85161940128101202313
принимают11986194012875145221297371460522627688
119206194012870
мкмоль/(млмин).202461940128891572463163874504895356246942719619401287727956194012889164238285320
Биологическое12056441012883153223284354409479545608670735805868
значение.Активность2108644101285812719726432539546552826376441012835136204265339406481550613674738
ПНФ341364410128101202313
в37606441012870
печени38656441012878140211273348424
крыс43256441012871140235297
равна67,1±4,0.46576441012873135201276339408479514583660731766835870
Снижеается8516683012894169244340403465527589650715
она16016683012870145207
на18426683012875138
6,5-й20136683012871106176224298
мин23476683012888164238
механической26206683012889151220283357432502564626694764839
асфиксии.34946683012863125216291359422496570606
2.15.10207170012670106176245281
Определение138071700126109190268330401463542604685766828
активности22427170012670151220301375456526588657739
фосфорибозилпирофосфатсинтетазы30157170012698166229326395474555623694751830909990107011481218131613851447154516141683174518261907197520362105217522322342
(ФРПФС)в14277411012647167253361482583629705
биологическом21667411012670152221301370434514593655717798868964
материале31647411012696166235297375456525604666
по38657411012681150
увеличению40517411012670146208286367446508589670776
уровня48627411012670147217294374450
инозинмонофосфата272076530126811612312883694495446156967668649339941092116112291300