216
3231347818011156112
Равновесие1205596012878140207282352419480542617679
этой19195960128105166236311
реакции22665960128113175237305380455530
сдвинуто28325960128106176243317392463522592
влево.34605960128110180242308378413
Сдвиг39085960128138210276351408
его43515960128106164234
вправо,46215960128110184254317383452487
т.е.51445960128105140202237
в54165960128110
сторону,851839012862124194263334409479512
благоприятную1584839012871142204261332407477551616678753823926
для2730839012871142206
образования3156839012870141212273329399465528602677741
НАД-Н,412083901281012022973434454565839012835
достигается4820839012871142205266340398460523584645710
использованием8511080012875138213282353416471542608670744820881970
пирофосфат-семикарбазидного185610800128811552252963864565186096727337818429049931067113611981267133914011456153116031678174718051875
буферного37671080012876146235298368444513571640
раствора44421080012876138201262328397468530
(рН50101080012853122223
8,6).52681080012876111180227262
При85113210128101171247
использовании1133132101282282913654345055686236947608228979721047
последнего221613210128228297360430493563638700757827
НАДвосстанавливается307913210128253354449518589651713775837911974104011101184125113131376143614981562
в467713210128219
НАД-Н493113210128255355451499600
количественно.8511563012868138209284354416478540606668742818887923
Реактивы.12051805012886148218284385456516611646
1.12052046012870106
0,1513452046012870106176246
М162620460128125
пирофосфат-карбазидный1784204601287515122029038145051360466672777584390597510471109116512391309138514781554
буферный33722046012871142231293363439533607
раствор40152046012870132194255321392461
(РН45112046012847125226
8,6).47722046012870105175222258
2.12052287012870106
Этанол13452287012893154217292361431
(950).1811228701284711718619992257082452044228701284782
3.12052529012870106
Алкогольдегидрогеназа1345252901281021712393093674365075706417047628369089771047110411661241130413591422
0,6-1,028002529012870106176224293329398
Е32332529012886
на33532529012875138
кювету.35262529012868172238300361432466
Ход12052771012886155227
определения.146727710128220290360423494556617678748818884918
Точность25702771012886155226302372434495559
исследования316427710128225287350420480552622688751826900965
повышается,416427710128225294361455562625686747810874909
если510827710128212274344420
используется8513012012875138213282353416471542602663726790
кювета16763012012878183249311372435
спектрофотометра2146301201287114620927733940847856963970177085992198310521114
с32943012012872
длиной34013012012881151226301372446
хода38833012012879148220282
луча42003012012879149218280
2,545173012012879115185
см47373012012872160
(и49333012012855131
более).50993012012881151222284345392427
В8513254012894
кювету9803254012879184251312374444
вносится14573254012878153223286361423486550
пирофосфат-семикарбазидный20423254012886161231301392461524615677739787848910999107311421204127313451407146215371608168417771853
буферный39303254012882152242304374450544619
р-р45843254012881131201
(1/248203254012859128166237
объѐма50923254012881153226287376437
еѐ),8513495012862125171207
0,06109334950128147183253322
мл145134950128166236
этанола172234950128138199261336406476538
и229534950128153
¼248334950128183
объѐмаисследуемого27013495012814821929235444350557964170377383690797710381127119712551324
экстракта.406134950128137206268329400461529591653688
Добавляют478434950128173244315377444514578683744
дистиллированную851373701287114721027134541548555962970076782890397710481151
воду203637370128106176247318
дорабочего238837370128109180249312383453524586643713
объѐма313737370128107178251313401464
кюветы.363637370128106211277339400494529
Содержимое420037370128131202272335404502577665735797
кюветы503237370128106211277339400495
перемешивают8513979012875138208270359421529603669732837897
ичерез17833979012875146207278339395
322123979012871
мин23183979012889164238
измеряют25923979012876131220283351416521583
значение32103979012854128191261324398473535
Е1.37813979012885386640340824568
Добавляют12054220012896166237300366436500605666
1190742200128118
Е206142200128134
алкогольДГ223042200128111181247318376445515579674755
и302142200128123
после317942200128124193256326389
окончании360142200128119188257333403465540614690
реакции432642200128118181243310385460534
измеряют490042200128124179268331399464569631
значение8514461012855131193264326400476537
Е21424446101281031527451608245
.15724461012835
Продолжительность1642446101281191882583303994695666417037658358989731043110511671231
реакции29074461012888150212280355429505
обычно34474461012887158252323397467
составляет39494461012880150212273336402472536597659
неменее46434461012892155244306380443505
10-1551834461012887156207276347
мин.8514702012889164239275
По116147020128153223
окончании142047020128122191260336406468542617692
реакции214747020128123187250318392468542
вновь272447020128119194263330394
добавлябт315347020128123194265328394464528598660
тот384847020128114184246
жеобъѐм412947020128149211281351424486575
фермента473947020128144206276365427502566627
и540147020128128
измеряют8514945012875131220282351416521582
значение14684945012858134195266328402478540
Е3204549450128862131500008245
.21764945012835
Для22494945012896166230
расчѐтов25154945012872134197267329390460527
содержания30774945012866135205268337435497571647711
НАД382649450128101202297
принимают41584945012879148223297373462523628689
ΔЕнад48854945012890176506350000824888133
=52344945012879
(Е2534849450128501365484500008245
–Е185151860128701571007524108245
)10535186012847
–11355186012882
(Е3125251860128601461396524108245
-1464524108235
Е2149951860128861584524108245
),1630518601284782
где17475186012870140203
(Е2198551860128591432128524108245
-2196524108235
Е2225951860128862344524108245
)23905186012847
–24725186012882
поправка25905186012888157232302364430498561
на31865186012886149
изменение33705186012888144233295370431506581643
оптической40495186012881156218293363425487556626701
плотности47855186012887157227289362433495556631
в54505186012880
кювете8515427012868173239301363425
при13115427012875144220
внесении15665427012866141203265327401477551
фермента.21535427012891153222311374447509571606
Содержание12055669012894164236297368464526600676739
НАД197956690128134235330
рассчитывают,234456690128103165228290360435497590656719824884919
исходя329856690128108173242312384448
из378156690128108164
коэффициента398056690128101170231322412487561637699773834896
молярной491156690128122193263327396472542617
экстинкции8515911012860128191252327402470545620694
и158159110128131
длины174759110128128198273347442
кюветы.222459110128124229296357419512547
Опыт280659110128159234328390
с323059110128118
контрольной338359110128124194270332402471542606680750825
пробой424459110128131200271342411487
проводят476659110128134204273340410481546607
в540859110128122
аналогичной8516152012862137200270340397472543617687762
кювете,164961520128219324390450512574609
в229361520128218
которой254661520128220289351421491561636
исследуемый321661520128227290352423485555626686775869945
экстракт419661520128212279341403473536603664
заменѐн489561520128208270359421495558632
дистиллированной851639301287114721027134541548555962970076682790297710471122
водой.20086393012866135207276351386
Содержание120566370126101171242305383485554635715777
НАДФ219566370126109211305425
определяют28326635012870146215278348411481546651711
путѐм357866350128249319379441530
перевода414266350128248311380443509579650713
его489066350128236293362
в528866350128240
восстановленную85168770128661361992613233854595295966667288028779481051
форму19366877012891162232322392
посредством23626877012875146208277340411473535601670759
следующей31566877012862131193264335438546608683
реакции:38746877012871133195264338413488526
Глюкозо-6-фосфат1205711801288115125632439445051956663568377484390699710581120
+23607118012879
НАДФ247371180128102203298409
Гл-6-Ф291670880825191121166197269
ДГ6-фосфоглюконат32087088082581093316711801287011820927834143250155962973380187094610081070
+44217118012879
НАДФ-Н+Н+.453471180128102203297407455556635736527070880825153217118012835
Поскольку120573600128101171234302371442505573643
реакция20907360012870133195264339413478
необратима,28127360012875137207278347410471547635697732
количество37867360012868138209284354416478540606675
НАДФ-Н+Н+,470373600128101202297408457559638739544273300825154937360012835
образовавшееся8517601012870142212274330399465528594702764826887952
в18387601012866
реакции,19397601012870133194262337412488523
соответствует24977601012862131202263330390452514575642711772833
количеству33657601012869139209284355416479540606676
исходного40747601012876138208279350424495553622
НАДФ.473176010128102202297408443