Упрощенная HTML-версия
ОКБ, зав. лабораторией Иванова С.Ф.)*. Способность к фагоцитозу
— одна из основных функций лейкоцитов, поэтому её оценка широко
применяется для анализа их функциональной активности. Нами осу
ществлялась оценка периферических и локальных показателей фаго
цитарной, метаболической и бактерицидной активности лейкоцитов в
образцах крови из пальца и десны.
Оценка фагоцитарной активности нейтрофилов проводилась в об
разцах крови, взятых из микроциркуляторного русла капилляров десны
и капилляров пальца, в качестве антикоагулянта применялся гепарин
(20 ед/мл).
При оценке фагоцитарной активности лейкоцитов (поглотительной
и переваривающей) в качестве объекта фагоцитоза использовались ча
стицы латекса, диаметром 1,6 нм (к 0,05 мл цельной крови добавили
равный объем стандартной суспензии латекса). Реакцию составили в
лунках планшета для иммунологических исследований. Смесь инкуби
ровали при 37 С в течении 60 минут при частом перемешивании, цен
трифугировали1^ минут при 800g, надосадочную жидкость сливали. Из
отмытого осадка готовили мазки, их фиксировали и окрашивали по Ро
мановскому. При микроскопии под иммерсией вычисляли фагоцитар
ный индекс Гамбургера (ФИ ) — процент фагоцитов, имеющих погло
щенные частицы, от общего числа лейкоцитов.
Метаболическую и бактерицидную активность лейкоцитов оценива
ли с помощью цитохимического теста восстановления нитросинего те-
тразолия фагоцитами человека и превращения его в формазан (НСТ-
тест). Методика определения НСТ-теста следующая: 0,02 ml 0,2% ра
створа НСТ добавляли к 0,02 ml цитратной крови. Реакцию ставили в
лунках планшет для иммунологических исследований. Смесь инкубиро
вали при 370°С в течение 30 минут. Делали мазки, фиксировали спир
том и подкрашивали 1% раствором нейтрального красного. Подсчиты
вали процент формазанположительных нейтрофилов, содержащих си-
не-фиолетовые гранулы формазана. Активность фагоцитов рассчиты
вали по формуле:
лгъ _ C<4x0+ Bxl + Cx3 + Dx3)
Too
’ ГАе
А — количество клеток с единичными гранулами,
В — количество клеток с гранулами на 1/3 ядра,
* Лабораторная часть работы консультирована главным клиническим фармакологом ГУЗЛО,
к.м.н. заведующим курсом клинической фармакологии доцентом Скальским С.И.
(специальность 14.00.25 — фармакология).
39