Упрощенная HTML-версия
69
Параметры температурных циклов:
95˚С – 3 мин 1 цикл
60ºС – 10 сек
72ºС – 15 сек
95ºС –10 сек
62ºС – 10 сек
40 циклов
72ºС – 15 сек
72ºС - 2,5 мин
20ºС - хранение
Продукты рестрикции разделялись с помощью электрофореза в 8%
полиакриламидном геле. Учет результатов реакции выглядел следующим
образом:
1.
В дорожке, соответствовавшей контрольному образцу с генотипом G/G,
была зафиксирована одна светящаяся оранжевая полоса на уровне 219 п.о.
Образцы, содержавшие аналогичную полосу большей или меньшей
интенсивности, имели генотип G/G.
2.
Образцы, содержавшие две светящиеся полосы большей или меньшей
интенсивности на уровне 200 п.о. и 219 п.о., имели генотип G/A.
3.
Образцы, содержавшие только одну светящуюся оранжевую полосу
большей или меньшей интенсивности на уровне 200 п.о., имели генотип А/А.
4.
В дорожке, соответствовавшей отрицательному контрольному образцу,
не наблюдались светящиеся полосы на уровне 219 п.о. и 200 п.о.
Исследование полиморфизма в промоторном регионе
гена CD14
(-260) С→Т
Для выявления полиморфного сайта гена CD14 (-260) C→T человека,
выделенного из лейкоцитов периферической крови, применялся набор, в
состав которого входили: раствор 1 (1х) для полимеразной цепной реакции,
Taq-полимераза, ДНК контрольная (гетерозигота), вода деионизированная,
рестриктаза, буфер для нанесения.