Упрощенная HTML-версия
38
2.3. Лабораторные методы исследования
2.3.1. Изучение состояния местного иммунитета полости рта
Нами предпринято исследование состояния местного иммунитета на
уровне десневой жидкости зубодесневой борозды. Исследования
проводились на базе Академического центра лабораторной диагностики
(АЦДЛ) ГОУ ВПО Омской государственной медицинской академии
Росздрава (заведующая – д.м.н., профессор Т.И. Долгих).
Иммунологическая реактивность тканей пародонта определялась по уровню
Ig классов G, A, М в десневой жидкости. Определение содержания Ig G, A, М
проводили методом трёхфазного иммуноферментного анализа: концентрации
Ig G, A, М – наборами ЗАО «Вектор-Бест» (г. Новосибирск). Для забора
материала была использована оригинальная методика [50]. Суть данной
методики заключалась в следующем. Специальные диски круглой формы
диаметром 6,0 мм, изготовленные из хроматографической бумаги, помещали
в зубодесневую борозду. Когда они пропитывались жидким содержимым, их
высушивали на воздухе при комнатной температуре, помещали в
пластиковые стерильные пробирки (V = 1,5 см
3
; «Медполимер», Санкт-
Петербург) и хранили при t = -18° C. Жидкостную ёмкость фильтров,
использованных для забора материала, оценивали в контрольных
исследованиях по их способности впитывать определённый объём
дистиллированной воды. Диск взвешивали до и после пропитывания его
водой и определяли соответствующее изменение веса. Среднее значение
массы жидкости, поглощённой одним фильтром, было стандартным и
составило 2,10±0,11 мг. Содержимое фильтров экстрагировали в постоянном
объёме солевого буферного раствора (рН = 7,2). Дальнейшие исследования
выполняли по инструкции, прилагаемой к указанному выше набору.
Исследование параметров системы клеточного иммунитета проводилось:
1)
методом розеткообразования;
2)
с использованием проточной лазерной цитометрии [46].
Оценка фагоцитиующей способности нейтрофильных гранулоцитов
получена методом с использованием в качестве фагоцитируемых объектов
взвеси односуточной культуры стафилококка штамма 209 [27].
Количество нейтрофильных гранулоцитов в 1 мкл десневой жидкости
вычислялось по формуле: Х = (А х В) : 100, где
А – количество лейкоцитов в 1 мкл десневой жидкости;