Упрощенная HTML-версия
53
определения находящихся на эритроцитах ВНСММ эритроцитарную массу
разводили 1:1 изотоническим раствором натрия хлорида, перемешивали и
осаждали белки 15% раствором ТХУ в соотношении 2:1, как и при
исследовании плазмы. Через 5 минут центрифугировали при 3000 об/мин в
течение 30 мин. Супернатант разводили дистиллированной водой 1:9 и
фотометрировали против контроля. Расчет результатов производили путем
интегрального измерения площади фигуры, образованной осью абсцисс и
полученными значениями экстинкций для каждого типа определения: плазмы,
эритроцитов, мочи. Отдельно рассчитывали показатели при длинах волн 238,
242 и 246 нм. Известно, что в этом спектре длин волн регистрируются вещества
катаболического происхождения, ксенобиотики, продукты распада клеток
тканей, микробной природы и т.д. [110]. Кроме того, на основании значений
экстинкций строили спектрограммы. Расчет количества ВНСММ производился
по формулам:
ВНСММ
пл
= (Е
238
+Е
242
+Е
246
+…Е
298
*4) усл.ед.;
ВНСММ
эр
= (Е
238
+Е
242
+Е
246
+…Е
298
*4) усл.ед.;
ВНСММ
мочи
=(Е
238
+Е
242
+Е
246
+…Е
298
*4) усл.ед.;
Содержание олигопептидов в плазме крови
определяли по методике,
предложенной Лоури [227]. Для этого к 1 мл разведенного в соотношении 1:9
супернатанта [95], полученного при осаждении белков исследуемой среды 15%
раствором трихлоруксусной кислоты, добавляли 2 мл щелочно-медного
реактива. Полученный раствор инкубировали в течение 10 мин при комнатной
температуре. Затем добавляли 0,2 мл реактива Фолина-Чокалтеу,
перемешивали и через 30-40 мин измеряли величину оптической плотности при
длине волны 750 нм на спектрофотометре СФ-46. В качестве стандарта
использовали раствор альбумина с заведомо известной концентрацией.
ВНСММ и олигопептиды определяли в плазме, а не в сыворотке крови в связи с