Упрощенная HTML-версия
62
2.2.4. Иммунологические методы исследования
В качестве материала для исследования служила венозная кровь. Взятие
крови у больных проводилось утром натощак в количестве 5 мл при
установлении диагноза нозокомиальной пневмонии. Материал для
исследования подвергался замораживанию при температуре (-18ºС).
Размораживание образцов материала осуществлялось непосредственно перед
постановкой проб посредством обработки их в водяной бане при температуре
37ºС.
Исследование
цитокинов
проводилось
в
Центральной
научно-
исследовательской
лаборатории
(ЦНИЛ)
Омской
государственной
медицинской академии (руководитель ЦНИЛ – доктор медицинских наук,
профессор Долгих Т.И.; заведующая иммунологической лабораторией – доктор
медицинских наук, Соколова Т.Ф.).
Фактор некроза опухоли альфа (ФНО-α) в сыворотке крови определялся с
помощью набора реагентов «ProCon TNFα» фирмы «Протеиновый контур»
(г. Санкт-Петербург). Набор реагентов представлял собой комплект,
основными компонентами которого являлись моноклональные антитела
ФНО-α, сорбированные на поверхности лунок разборного полистирольного
планшета; конъюгат моноклональных антител к ФНО-α с биотином;
калибровочные образцы, содержащие ФНО-α. Чувствительность данного
метода составляла 20 пкг/мл.
Интерлейкин-1 бета (ИЛ-1β) в сыворотке крови выявлялся с помощью набора
реагентов «ProCon IL-1b» (г. Санкт-Петербург). Набор предназначался для
количественного определения ИЛ-1β в биологических жидкостях человека.
Метод определения основывался на твердофазном «сэндвич»-варианте
иммуноферментного анализа (ИФА). Специфическими реагентами набора
являлись моноклональные антитела к ИЛ-1β, сорбированные на поверхности
лунок разборного полистирольного планшета; конъюгат моноклональных