Упрощенная HTML-версия
момента взятия материала до начала посева не должно проходить
более 2-х часов.
Грамотрицательные неспорообразующие
облигатно-анаэробные бактерии
Большинство грамотрицательных анаэробных бактерий мо
гут быть изолированы на средах с добавлением канамицина и ван-
комицина, гемина, витамина Кз или а также бараньих эритроци
тов (5%). К базовым относятся среды Columbia agar, Schaedler
agar. Исследуемый материал засевают из 10 6, 107и 10'8разведе
нии. Срок инкубирования должен составлять 48 часов при темпе
ратуре 35°С.
Эти среды позволяют культивировать бактерии, относящиеся
к родам
Bacteroides, Prevotella
и
Porphypomonas.
Бактерии рода
Fusobacterium
могут расти на вышеперечис
ленных средах. Однако, более предпочтительны среды Columbia
agar, Schaedler agar с добавлением крови и содержащие 3,2 мг/л
кристаллического фиолетового и 5 мг/л эритромицина.
Сразу после посева чашки со средами должны быть помеще
ны в микроанаэростат. Кроме того, туда же помещают палладие
вый катализатор для поглощения кислорода и индикатор для вы
явления свободного кислорода. Катализатор перед употреблени
ем регенерируют в сухожаровом шкафу при температуре 175-180°
С в течение 1 часа. Затем микроанаэростат закрывают, удаляют
из него воздух при помощи вакуумного насоса, после чего микро
анаэростат заполняют нулевым поверочным азотом.
Вновь удаляют газ из микроанаэростата, заполняют его газо
вой смесью (5% С02, 10% Н2, 85% N2) и помещают в термостат.
После 48 часов инкубации проводят первый учет чашек с отсе
вом типичных колоний на жидкие питательные среды для анаэро
бов для изучения культуральных свойств микроорганизмов и пос
ледующей идентификации, а также отсев на плотные питатель
ные среды, которые затем культивируют в аэробных условиях,
чтобы убедиться, что выросшие микроорганизмы не являются
факультативно-анаэробными. После первого учета чашки возвра
щают в анаэростат и инкубируют еще в течение
72
часов. Затем
79