7
тромбозов любой локализации, носительство тромбогенных полиморфизмов,
отказ от участия в предлагаемом исследовании.
Группу сравнения составили 127 здоровых женщин во второй фазе менст-
руального цикла, которые планировали в дальнейшем использовать ГК и не
имели противопоказаний к ее назначению. Материал исследования – кровь из
локтевой вены натощак (на 19-21 дни менструального цикла в контрольной
группе, на 19-21 у женщин, принимающих КОК), взятая в вакуумные
одноразовые пробирки, содержащие стабилизаторы, рекомендуемые методи-
ками анализа, соблюдая требования преаналитического этапа в гемо-
стазиологии [З.С. Баркаган и др., 1999; А.А. Козлов и др., 2007].
Методы исследования.
Клинико-анамнестическое обследование включало
пункты, отражающие возраст, социальное и семейное положение, а также
общие клинические приемы: жалобы, анамнез перенесенных соматических
заболеваний, семейный (особенно связанный с тромбозами в молодом
возрасте у ближайших родственников) и акушерско-гинекологический,
объективное общее и гинекологическое обследование по стандартной мето-
дике, с измерением АД, определением индекса массы тела (ИМТ), УЗИ
органов малого таза и молочных желез; ранее применявшиеся методы
контрацепции, наличие вредных привычек. Все данные вносили в
разработанную индивидуальная карту обследования. Приемлемость
используемого ГК оценивали по динамике ИМТ, АД, побочным эффектам,
субъективную оценку переносимости приема КОК женщины выражали как
хорошую, удовлетворительную или плохую. Женщин с отягощенным по
тромботическим осложнениям анамнезом обследовали на носительство
тромбогенных генетических полиморфизмов, при выявлении которых их
исключали из выборки.
Молекулярно-генетическое тестирование
выполнено методом ПЦР с
выявлением точечных мутаций в геноме человека. Определение ДНК-поли-
морфизмов проводилось по генам, кодирующим компоненты системы гемос-
таза: в тромбоцитарном звене – ITGA2 (GP Ia) 807 CT, ITGB3 (GP IIIa) 156
TC; в плазменном звене – 2756 AG, система протромбин (F2) 20210 GA,
ф.Лейден (F5) 1691 GA, фибриноген (FGB) 455 GA, ф. VII (F7) 10976 GA, ф.
XIII (F 13A1) GA и система фибринолиза SERPINE (PAI-1) 675 5 G4G; в
фолатном цикле метилентетрагидрофолатредуктазы MTHFR 677 CT, MTHFR
1298 AC, MTR 2756 AG, MTRR 66 AG (материал – геномная ДНК человека из
периферической крови) на базе КДЛ ОАО МСЧ «Нефтяник» (К.А. Осипенко).
Методы оценки тромбоцитарного гемостаза
.
1. Количественные
показатели ТЦ оценивали с помощью автоматического гематологического
анализатора МЕК (6.400 J-К, Япония). Определяли: общее количество ТЦ; их
средний объем (MPV), тромбокрит (PCT), ширину распределения по объему
(PDW). 2. Агрегацию ТЦ контролировали с помощью двухканального
лазерного анализатора АЛАТ2 «Биола» (Россия), оценивая по динамике
сдвигов светопропускания плазмы [Born, 1962; O' Brien, 1962], и по
изменению размеров образующихся агрегатов [3.А. Габбасов и др.,1989]. Как
индуктор использовали АДФ в конечной концентрации 5 мкмоль/л, согласно