Вид документа : Статья из журнала Шифр издания : Автор(ы) : Сайдакова Е. В., Шмагель К. В. Заглавие : Оценка функции тимуса на основе метода определения кольцевых ДНК Место публикации : Клиническая лабораторная диагностика. - 2011. - № 11. - С.45-49 (Шифр К4/2011/11) Примечания : Библиогр.: с. 49 (27 назв.) ГРНТИ : 76.35.33 + 76.03.55 MeSH-главная: Тимус -- Thymus Gland T-лимфоциты -- T-Lymphocytes ДНК кольцевая -- DNA, Circular MeSH-неглавная: Аннотация: Продукция Т-лимфоцитов вилочковой железой для нужд периферии является важным показателем функционирования иммунной системы. В статье представлен один из современных методов оценки продуктивной функции тимуса: количественный анализ внутриклеточных кольцевых ДНК Т-клеток (TREC — T-cell receptor excision circle) периферической крови. Последовательно рассмотрены этапы адаптации метода на основе реагентов и приборов отечественного производства. Для проведения качественной полимеразной цепной реакции (ПЦР) подобрана пара праймеров к специфической последовательности маркера недавних эмигрантов тимуса, проведена оптимизация температурного режима амплификации. С целью перехода к количественному анализу, основанному на методе ПЦР в реальном времени, создан флюоресцентный зонд, комплементарный нуклеотидной последовательности ампликона. Установлены следующие аналитические характеристики метода: чувствительность 4 нг/мл, воспроизводимость 1,8%. Показано достоверное различие концентраций TREC у людей разных возрастных группThe production of T-lymphocytes by thymus is an important indicator of functioning of immune system. The article discusses one of the actual techniques of evaluation of productive function of thymus i.e. qualitative analysis of intracellular circular DNA of T-cells of peripheral blood (TREC). The stages of adaptation of technique on the basis of nationally produced reagents and instruments. To assure the implementation of qualitative polymerase chain reaction a pair of primers with specific sequence of marker of recent thymus emigrants was selected. The optimization of temperature regimen of amplification was made. To ensure the transition to the qualitative analysis on the basis of polymerase chain reaction technic in real-time a fluorescent probe complementary to amplicone nucleotide sequence was developed. The following analytic characteristics of technique were established: sensitivity 4 ng/ml, reproducibility 1.8%. The valid discrepancy of TREC concentrations inpatients of different age groups is demonstrated Держатели документа: ОмГМУ : 644099, г. Омск, ул. Ленина, 12 Доп.точки доступа: Шмагель, К. В.